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文檔簡介
1、目的：制備攜帶P16a基因的聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒并在喉癌細胞中進行表達。
方法：選用乳化聚合法制備聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒(PBCANPs)，以激光粒度分析儀及透射電子顯微鏡分析納米粒的形態(tài)和粒徑。用陽離子表面活性劑十六烷基三乙基溴化銨(CTAB)對納米粒進行表面修飾。構(gòu)建真核表達載體pIRES2-EGFP-P16a經(jīng)過酶切鑒定及測序后與PBCA-NPs連接，轉(zhuǎn)染喉癌細胞Hep-2，熒光顯微鏡檢測轉(zhuǎn)染效率，蛋白印跡法檢
2、驗P16a基因的表達，流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率。
結(jié)果：所制PBCA-NPs粒徑均勻、Zeta電位較高，較為理想；重組質(zhì)粒pIRES2-EGFP-P16a經(jīng)過酶切鑒定及測序后，表明真核表達載體構(gòu)建正確；PBCA-NPs可以介導(dǎo)pIRES2-EGFP-P16a高效轉(zhuǎn)染喉癌細胞，蛋白印跡檢測表明轉(zhuǎn)染后喉癌細胞能夠表達外源P16a基因，外源P16a基因的表達能有效抑制喉癌細胞的惡性增殖并能誘導(dǎo)細胞凋亡。
結(jié)論：聚氰
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