類風濕關節(jié)炎滑膜成纖維細胞粘著斑激酶與p53對細胞增殖的研究.pdf

1、背景：
　　類風濕關節(jié)炎（RA）以慢性和侵蝕性滑膜炎為主要特點的一種自身免疫病，可影響多個關節(jié)導致其破壞、變形，并最終造成身體殘疾，給患者帶來極大的痛苦。RA患病率為0.5％～1%，大量研究表明成纖維樣滑膜細胞（FLS）的異常增生是RA發(fā)病的關鍵。粘著斑激酶（FAK）是一種蛋白激酶，參與細胞內的信號轉導。在腫瘤研究領域，F(xiàn)AK能通過其N-末端的FERM結構域與p53結合,進而抑制細胞凋亡，即FAK可通過抑制p53基因的表達來阻止腫

2、瘤細胞凋亡從而導致腫瘤的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)RA患者FLS與腫瘤細胞有許多相似的特性，如進行性增生、遷移和侵襲，其機制可能同腫瘤細胞無限增殖及轉移的機制相似。我科前期研究表明，F(xiàn)AK在RA滑膜組織中表達量較正?；そM織顯著升高，且通過抗風濕治療后，可抑制FAK表達，促進FLS凋亡，這表明FAK在FLS的過度增生過程中起重要作用。還有研究表明，p53缺失可能參與RA滑膜組織增生這一病理過程。那么在RA的發(fā)病過程中，F(xiàn)AK是否可與p53相互作用，

3、使p53表達減少導致FLS過度增殖，從而參與RA的發(fā)病機制，值得研究。
　　目的：
　　1、通過體外研究FAK、p53在RA成纖維滑膜細胞中的表達，探討RA的發(fā)病機制；
　　2、探討FAK、p53對RA成纖維滑膜細胞增殖的影響，為治療RA提供新靶點。方法：
　　1、取確診的RA患者滑膜組織進行體外培養(yǎng)；
　　2、對體外培養(yǎng)的RA患者滑膜細胞進行不同處理，分別加入TNF-α（10ng/ml）及不同濃度的蛋白酶

4、抑制劑（MG-132）（1μM、5μM、10μM、20μM），48h后RT-PCR檢測各組FLS上FAK及p53 mRNA的水平；
　　3、體外培養(yǎng)的滑膜細胞分別加入不同濃度的蛋白酶抑制劑（MG-132）（1μM、5μM、10μM、20μM），分別于處理后的24h、48h、72h、96h進行細胞增殖試驗；
　　4、采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析。
　　結果：
　　1、TNF-α作用后滑膜細胞的FAK mRNA水

5、平較對照組增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；TNF-α作用后p53 mRNA水平與對照組比較有所降低，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；
　　2、MG-132作用后滑膜細胞的p53 mRNA水平較對照組增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），以濃度為5μM時p53 mRNA水平最高；MG-132作用后FAK mRNA水平較對照組有所降低，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；
　　3、不同濃度的MG-132作用后，F(xiàn)LS的