耐甲氧西林金黃色葡萄球菌mrsa檢測(cè)熒光pcr法

1、上海之江生物科技股份有限公司Shanghai ZJ Bio-Tech Co., Ltd.,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA) 檢測(cè)（熒光PCR法）,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,金葡/表葡/腐生,致病性強(qiáng),耐甲氧西林金葡,葡萄球菌,金黃色葡萄球菌,MRSA,1. MRSA背景資料——What Is MRSA?,金黃色葡萄球菌致病性,1、金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌 2、可引起局部化膿感染，也可引

2、起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至嚴(yán)重到敗血癥、膿毒癥等全身感染。 3、 其致病的強(qiáng)弱取決于其產(chǎn)生毒素和侵襲性酶 溶血毒素 殺白細(xì)胞素 血漿凝固酶 腸毒素,金葡菌的院內(nèi)感染,手術(shù)切口感染各種插管感染下呼吸道感染尿路感染胃腸感染皮膚和軟組織感染血液感染,病人往往抵抗力低下正常醫(yī)療操作可能導(dǎo)致病人的正常免疫屏障受損接受化療、激素治療等治療容易

3、出現(xiàn)免疫力迅速降低不合理大量抗生素治療容易導(dǎo)致菌群失調(diào)醫(yī)院是病原體相對(duì)集中的環(huán)境菌群交叉感染等,SA VS MRSA — 耐藥的產(chǎn)生機(jī)制,一種特殊蛋白的產(chǎn)生低親和力的青霉素結(jié)合蛋白PBP2α,mecA基因 PBP2α 耐藥性,,,金葡的耐藥性,STAPHYLOCOCCI,Coagulase Negative Staphylococci,S. aureus,MSSA,MRSA,,,,,對(duì)于MRS

4、A萬(wàn)古霉素常是治療的唯一藥物，而萬(wàn)古霉素具有很強(qiáng)的副作用，易導(dǎo)致病人出現(xiàn)肝腎問(wèn)題。同時(shí)，萬(wàn)古霉素的使用會(huì)誘發(fā)耐萬(wàn)古霉素金葡（VRSA）的產(chǎn)生，致使尤其引起的各種感染發(fā)展到無(wú)藥可用的地步。因而在未確定是耐藥性金葡感染前需特別注意慎重用藥。,近年在南歐部分國(guó)家和英國(guó)MRSA在金葡菌感染中的檢出率在大型醫(yī)院達(dá)到了30％-50％。在德國(guó)，1996-2006年間MRSA的感染率不斷增長(zhǎng)達(dá)到了20％-22％，德國(guó)的一所大型教學(xué)醫(yī)院(kath—ar

5、inen hospita1)MRSA感染的病例在1994—2003年間上升了277％,國(guó)外,SA院內(nèi)攜帶率普查—北京某三甲醫(yī)院,SA院內(nèi)現(xiàn)狀,SA耐藥率現(xiàn)狀,MRSA,《多重耐藥菌醫(yī)院感染預(yù)防與控制技術(shù) 指南（試行）》,2011年國(guó)家衛(wèi)生部出臺(tái)文件，為了進(jìn)一步加強(qiáng)多重耐藥菌醫(yī)院感染預(yù)防與控制 ，制定了,MRSA,醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)積極開展常見多重耐藥菌的監(jiān)測(cè)。對(duì)多重耐藥菌感染患者或定植高?；颊咭M(jìn)行監(jiān)測(cè)，及時(shí)

6、采集有關(guān)標(biāo)本送檢，開展主動(dòng)篩查，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)、早期診斷多重耐藥菌感染患者和定植患者。,,生化鑒定（乳膠凝集） VS PCR快速檢測(cè),金葡菌鑒定：,耐藥性鑒定：,藥敏試驗(yàn)（K-B法） VS PCR快速檢測(cè),金葡傳統(tǒng)臨床鑒定方法,其他方法：細(xì)菌鑒定儀,,,,培 養(yǎng),分離培養(yǎng),藥敏紙片,1 day,2 day,3 day,乳膠凝集實(shí)驗(yàn),0 day,,取標(biāo)本,取標(biāo)本,,PCR,快速PCR操作流程,2Hour~4Hour ！,如何用PCR

7、檢測(cè)SA&MRSA？,PCR檢測(cè),Nuc —,Nuc +,非SA,MSSA,MRSA,mecA—,mecA+,檢測(cè)判讀流程,Nuc FAM熒光標(biāo)記mecA HEX熒光標(biāo)記,www.themegallery.com,本試劑盒的臨床應(yīng)用方向,,,,臨床應(yīng)用,質(zhì)量第一 服務(wù)第一,本產(chǎn)品的檢測(cè)優(yōu)點(diǎn),1、公認(rèn)的篩查“金標(biāo)準(zhǔn)” 2002年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）指出金黃色葡萄球菌一旦檢出mecA基因即可

8、定為MRSA。PCR法檢測(cè)mecA基因被公認(rèn)為MRSA篩查檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”。2、特異性高 現(xiàn)已明確，大量產(chǎn)生的一種新的青霉素結(jié)合蛋白-PBP2a是葡萄球菌對(duì)甲氧西林耐藥的主要原因。mecA基因是PBP2a的編碼基因，只存在于葡萄球菌中，因此mecA基因可作為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分子標(biāo)志。熒光PCR方法就是通過(guò)直接檢測(cè)細(xì)菌染色體上的mecA基因來(lái)確定是否為耐甲氧西林菌株，不受藥敏實(shí)驗(yàn)條件的影響。3、檢測(cè)時(shí)間短 正確快速

9、地檢測(cè)出MRSA是尋找有效的抗菌藥物和控制MRSA院內(nèi)感染的關(guān)鍵。熒光PCR方法實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)間在3個(gè)小時(shí)以內(nèi)，當(dāng)天知道檢測(cè)結(jié)果。而目前其他檢測(cè)方法需2-3天的細(xì)菌培養(yǎng)，使檢測(cè)時(shí)間延長(zhǎng)，不利于及時(shí)調(diào)整使用抗生素治療方案和院內(nèi)感染控制。,質(zhì)量第一 服務(wù)第一,臨床監(jiān)測(cè)方案,1、 入院篩查 對(duì)入院患者進(jìn)行MRSA篩查，并采取有效的接觸預(yù)防措施，是控制MRSA擴(kuò)散的最有效手段。 對(duì)住院病人（尤其是ICU及燒傷科/

10、感染科/呼吸科/老干部科等）入院時(shí)應(yīng)進(jìn)行MRSA檢測(cè)，陽(yáng)性者考慮在相對(duì)隔離。（美國(guó)加利福尼亞，伊利諾，新澤西，賓夕法尼亞，華盛頓，肯塔基等16個(gè)州政府先后立法，要求所有住院患者強(qiáng)制性檢測(cè)，以減少院內(nèi)感染，提高病床周轉(zhuǎn)率，減低醫(yī)療資源的支出）。2、 指導(dǎo)患者用藥 治療過(guò)程中應(yīng)定期監(jiān)測(cè)，以便及時(shí)調(diào)整抗生素及治療方案（萬(wàn)古霉素是首選藥物）。治療過(guò)程出現(xiàn)并發(fā)感染，需要定期檢測(cè)，檢測(cè)對(duì)象選擇感染部位。,本試劑盒的臨床應(yīng)用方向,1、治

11、療性應(yīng)用： 痰液、血標(biāo)本：即時(shí)檢測(cè)，快速診斷金黃色葡萄球菌及其耐藥性。如：菌血癥，敗血癥等。 感染病灶標(biāo)本（傷口分泌物、咽拭子、痰等）：快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌及其耐藥性。如：肺炎、傷口感染等。,2、預(yù)防性應(yīng)用： 鼻拭子標(biāo)本：進(jìn)入ICU病房，進(jìn)入手術(shù)易感科室病房（骨科、外科等）前的檢測(cè)，避免院內(nèi)感染。,產(chǎn)品應(yīng)用,國(guó)內(nèi)首個(gè)獲得SFDA注冊(cè)號(hào)的MRSA PCR法檢測(cè)試劑盒,臨床開展醫(yī)院：浙江大