耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢測與多重耐藥的研究.pdf

1、目的：評價頭孢西丁紙片擴散、MHA中添加2％NaCl的苯唑西林紙片擴散、苯唑西林-鹽瓊脂篩選、青霉素結(jié)合蛋白2a(PBP2a)膠乳凝集4種方法檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的臨床應(yīng)用價值，尋求適合臨床微生物實驗室檢測MRSA的簡易、準確方法；研究本地區(qū)MRSA的多重耐藥狀況，為探討MRSA耐藥機制及臨床用藥提供依據(jù)。 方法：對安徽省細菌耐藥監(jiān)控中心提供2005年度各監(jiān)控單位送檢100株金黃色葡萄球菌，分別進行頭孢西丁紙

2、片擴散、MHA中添力12％NaCl的苯唑西林紙片擴散、苯唑西林-鹽瓊脂篩選、PBP2a膠乳凝集試驗，以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測mecA基因為MRSA檢測金標準，按CLSI 2006版標準操作和判讀結(jié)果；收集51株MRSA，用青霉素酶酸測定法、Kirby-Bauer(K-B)法檢測MRSA產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶以及對紅霉素、克林霉素、紅霉素誘導克林霉素耐藥(D試驗)、4種氟喹諾酮類藥物(氧氟沙星、諾氟沙星、左旋氧氟沙星、加替沙星)和萬古霉素耐藥

3、性。 結(jié)果：頭孢西丁紙片擴散、MHA中添加2％NaCl苯唑西林紙片擴散、苯唑西林-鹽瓊脂篩選、PBP2a膠乳凝集檢測MRSA靈敏度和特異性分別為96.3％(26/27)和100.0％(73/73)、77.8％(21/27)和100.0％(73/73)、92.6％(25/27)和94.5％(69/73)、100.0％(27/27)和100.0％(73/73)，其中2株MRSA在苯唑西林.鹽篩選瓊脂上24h未生長但延長至48h生長，

4、48h內(nèi)敏感性100.0％(27/27)，但特異性降至89.0％(65/73);與PCR比較，MHA中添加2％NaCl苯唑西林紙片擴散檢測MRSA統(tǒng)計學差異有顯著性(P<0.05)，頭孢西丁紙片擴散、苯唑西林.鹽瓊脂篩選、PBP2a膠乳凝集試驗檢測MRSA統(tǒng)計學差異均無顯著性(p<0.05);安徽省2005年度細菌耐藥監(jiān)控中心金黃色葡萄球菌MRSA分離率達27.0％(27/100)；51株MRSA頭孢西丁紙片抑菌環(huán)直徑介于6-20mm之

5、間，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶率為84。3％(43/51)，對紅霉素、克林霉素、氟喹諾酮類、萬古霉素耐藥率分別為98.0％(50/51)、86.3％(44/51)、88.2％(45/51)、0.0％(0/51)，3株MRSA紅霉素誘導克林霉素耐藥，誘導耐藥率為50.0％(3/6)。 結(jié)論：頭孢西丁紙片擴散、MHA中添加2％NaCl的苯唑西林紙片擴散、苯唑西林-鹽瓊脂篩選、PBP2a膠乳凝集試驗均能可靠檢測MRSA，PBP2a膠乳凝集可代替P