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文檔簡介
1、背景和目的:耐甲氧西林葡萄球菌(Methicilin-resistant Staphylococcusaureus,MRSA)是臨床常見的重要病原菌,在世界范圍內(nèi)廣泛蔓延,甚至引起感染的暴發(fā)流行。同時(shí),MRSA具有很強(qiáng)的耐藥性,給臨床的治療帶來極大的困難。了解醫(yī)院內(nèi)MRSA的多態(tài)性,可以為臨床合理、有效地使用抗生素和控制耐藥基因在種群間的傳播提供幫助。本文研究目的是明確本地區(qū)MRSA的基因型別,探討MRSA菌株流行變化趨勢及進(jìn)化特點(diǎn),為
2、本地區(qū)MRSA的防治提供科學(xué)依據(jù)。
方法:依據(jù)VITEK-Compaet全自動(dòng)細(xì)菌鑒定/藥敏儀對177株金黃色葡萄球菌的藥物敏感結(jié)果,初步篩選出MRSA,再用PCR方法對MRSA特異性基因(甲氧西林耐藥基因)mecA檢測,以確證MRSA。再用PCR技術(shù)對MRSA進(jìn)行葡萄球菌盒式染色體mec基因、葡萄球菌A蛋白基因、luk基因毒力測定,并開展多點(diǎn)序列分型,與國際上MRSA的流行型別進(jìn)行比較,來分析進(jìn)化關(guān)系。并結(jié)合流行病學(xué)資料予以
3、分析。
結(jié)果:
1.MRSA確證:90株MRSA對頭孢西丁、苯唑西林均表現(xiàn)耐藥,且Meca基因(MecA147、MecAP4-P7)測定后均呈陽性,確證此90株為MRSA。
2.MRSA基因分型:成功分型86株,結(jié)果報(bào)告如下
2.1葡萄球菌A蛋白(spa)基因多態(tài)性分析:86株MRSA共發(fā)現(xiàn)13個(gè)spa型,以t311型為主,42株;其次為t6418型,10株。
2.2 MLST分型:86
4、株MRSA共發(fā)現(xiàn)9個(gè)ST型,以ST5為主,51株;其次為ST239,14株;ST59,10株;ST1,3株;ST88,4株;ST630、ST573、ST965、ST1921各1株。經(jīng)eBURST軟件分析它們屬于4個(gè)群(group1、group6、group8、group12)和8種克隆復(fù)合體(CC1、CC5、CC630、CC20、CC59、CC88、CC239、CC573。)
2.3 SCCmec基因分型:分離出的MRSA以S
5、CCmecⅡ型為主,53株(61.6%);其次為SCCmecⅢ型,19株(22%);SCCmecⅠ型7株;SCCmecⅣ型5株(社區(qū)相關(guān)性MRSA);未明確型的有2株。
86份菌株中以group1為主(71株,82.6%),其中第一流行克隆為SCCmec-Ⅱ-ST5-t311-CC5(41株,47.7%),第二位的流行克隆為SCCmec-Ⅲ-ST239-t030/t037-CC239(11株,12.8%)。
3.殺細(xì)
6、胞毒素(PVL):其中90株MRSA中有6株,全部為SCCmec-Ⅲ-ST59-t6418-CC59克隆,陽性率為6.67%。
結(jié)論:
2009-2012年間本地區(qū)分離自無菌體液標(biāo)本的金黃色葡萄球菌中MRSA的檢出率為50.9%,SCCmec-Ⅱ-ST5-t311為本地區(qū)當(dāng)前流行菌株;CA-MRSA菌株的出現(xiàn),提示MRSA菌株有由醫(yī)院向社區(qū)播散的趨勢;此外,對新發(fā)展了單位點(diǎn)變體的菌株(SCCmec-Ⅰ-ST1921-
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