耐甲氧西林金黃色葡萄球菌分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 用脈沖場凝膠電泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis，PFGE）及多重PCR技術(shù)對天津市南開醫(yī)院臨床分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（Methicillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA）株進行染色體指紋圖譜分析和葡萄球菌染色體mec基因盒（Staphylococcal Cassette Chromosome mec，SCCmec）基因分型，以了

2、解該院院內(nèi)感染MRSA菌株的流行特征。
　　 方法：
　　 （1）臨床送檢標(biāo)本按常規(guī)方法初步鑒定為葡萄球菌屬，然后根據(jù)血漿凝固酶及生化反應(yīng)的結(jié)果鑒定金黃色葡萄球菌，再進行頭孢西丁藥敏試驗，確定MRSA，質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923。
　　 （2）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物敏感試驗采用K-B紙片擴散法，測試其對14種抗菌藥物的敏感性，藥敏結(jié)果按NCCLS（2004年版）的標(biāo)準(zhǔn)判讀。
　　 （

3、3）對40株MRSA進行PFGE分析、mecA基因檢測及SCCmec基因分型。
　　 結(jié)果：
　　 （1）菌株來源：40株MRSA中28株來源于痰液，占70％；來自腹水或腹腔引流液的7株（17.5％）；傷口引流液和血液各2株（5.0％）；咽拭子1株（2.5％）。
　　 （2）SCCmec分型：Oliveira法和Zhang法將40株MRSA分為四個型別，Ⅲ型為主，共33株，占82.5％；Ⅴ型5株（12.5％）；Ⅰ

4、型和Ⅳ型均為1株（2.5％）。
　　 （3）PFGE分型：40株MRSA可被分為A-E五個型別，其中A型21株，占52.5％；B型8株（20.0％）；C型4株（10.0％）；D型6株（15.0％）；E型1株（2.5％）。
　　 （4）PFGE各型別與耐藥譜：除對共同的5種抗生素（克林霉素、紅霉素、頭孢西丁、苯唑西林、青霉素）耐藥外，各型還另對其他種類的藥物耐藥，如A型對6種，B型對2種，C型對4種，D型對5種，E型對4種

5、藥物耐藥。
　　 （5）通過分析不同PFGE型別的院內(nèi)感染MRSA菌株的時間和空間分布，可清晰地追溯各型菌株在該院的分布和傳播情況。
　　 結(jié)論：
　　 （1）本研究所用菌株來源于住院患者的不同感染部位，但痰液的MRSA檢出率最高，這顯然與呼吸道為葡萄球菌的主要定植部位有關(guān)。
　　 （2）在07至08兩年的時間里，僅收集到40株院內(nèi)感染MRSA，這40株菌又分屬于A-E五個PFGE型別，說明天津市南開醫(yī)院

6、住院患者所感染的MRSA不是來自同一克隆株，故呈散發(fā)流行。
　　 （3）所有40株MRSA菌株均為多重耐藥，但表現(xiàn)出各PFGE型菌株共有耐藥性和型相關(guān)性耐藥表型；這種耐藥譜的差別對指導(dǎo)用藥有參考意義。
　　 （4）本研究所涉及的MRSA菌株，SCCmec分型以Ⅲ型為主，符合院內(nèi)感染MRSA菌株的特征。PFGE分型和SCCmec分型分別從不同方面研究這組MRSA菌株，通過綜合兩方面的研究結(jié)果，可在分子水平對醫(yī)院內(nèi)分離到的M