抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)天然產(chǎn)物的篩選及研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起化膿性感染和醫(yī)院感染的常見病原菌,由于細(xì)菌本身的進(jìn)化和藥物的濫用導(dǎo)致其耐藥性逐漸增強(qiáng),特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)嚴(yán)重影響人類健康,如何防治已成為全球關(guān)注的焦點。MRSA具有多重耐藥的特性,對目前絕大多數(shù)的抗菌藥耐藥,甚至對目前臨床最為有效的萬古霉素也開始出現(xiàn)耐藥,一旦M

2、RSA發(fā)展到對萬古霉素普遍耐藥,MRSA感染患者將面臨無藥可治的危險境地,因此研究開發(fā)新的抗MRSA藥物具有重大意義。
　　 中藥中蘊(yùn)藏著多種有效成份,天然化合物極具結(jié)構(gòu)復(fù)雜性和多樣性,是開發(fā)新藥的一個巨大寶藏,也是我國新藥開發(fā)的一個優(yōu)勢所在。許多中藥都具有抗菌活性,如板藍(lán)根、穿心蓮、溪黃草、黃柏和魚腥草等,其單體成分如小檗堿、大黃素、穿心蓮內(nèi)酯和去氫貝母堿是其抗菌活性成分等。多種耐藥菌對中藥的抗菌物質(zhì)仍然敏感,提示中藥在耐藥菌

3、株的治療方面也有明顯優(yōu)勢。
　　 本課題對幾十種中草藥提取物和中藥單體進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究,并對抗MRSA活性較強(qiáng)的中草藥和中藥單體進(jìn)行了深入研究,旨在尋找到新的抗MRSA活性成分,為開發(fā)新的抗MRSA藥物提供理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。
　　 課題分為三個部分:
　　 一、對23種中草藥提取物的抗MRSA活性進(jìn)行了篩選
　　 采用96孔板法初步測定了23種中草藥水提物和醇提物的抗MRSA活性,從中篩選出8種具有

4、較強(qiáng)抗MRSA活性的中草藥,分別為仙鶴草、蒲公英、夏枯草、半枝蓮、側(cè)柏葉、桑葉、木瓜、大血藤,且抑菌效果與濃度呈正相關(guān)性。進(jìn)一步測定了這8種中草藥提取物對11株MRSA的最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC),其中仙鶴草水提取物和醇提物抗MRSA活性最強(qiáng),其MIC和MBC的生藥濃度均為6.25mg.mL-1。
　　 二、對33種中藥單體的抗MRSA活性進(jìn)行了研究
　　 采用96孔板法測定了33種中藥單體對MRSA

5、的抗菌活性,從中發(fā)現(xiàn)10種中藥單體對MRSA具有抑制活性,分別為花旗松素、黃芩素、二氫楊梅素、原花青素、沒食子酸、姜黃素、熊果酸、白秋李醇、水飛薊賓、蘆竹堿、楊梅苷,其MIC分別為50μg.mL-1、50μg.mL-1、100μg.mL-1、100μg.mL-1、200μg.mL-1、400μg.mL-1、400μg.mL-1、400μg.mL-1、400μg.mL-1、400μg.mL-1、400μg.mL-1、800μg.mL-1。

6、同時我們進(jìn)一步研究了花旗松素、二輕楊梅素、原花青素3種抑菌作用相對較強(qiáng)的中藥單體對常見抗菌素的增敏作用,實驗結(jié)果結(jié)果表明這3種中藥單體對氧氟沙星、頭孢西丁鈉、氯霉素、頭孢唑啉鈉等4種常見抗菌素的抗MRSA活性無顯著的增敏作用。
　　 三、仙鶴草提取物抗MRSA有效成分的深入研究
　　 采用溶劑分離和柱層析相結(jié)合的方法對仙鶴草醇提物進(jìn)行了分離,采用96孔板法逐步驗證分離物的活性,結(jié)果石油醚萃取部分經(jīng)硅膠柱層析(乙酸乙酯:石