川楝子對肺癌的治療作用及其機(jī)制初步研究.pdf

1、肺癌是近年來發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤之一，是癌癥中影響人類生命安全和健康的第一殺手。雖然近年來在肺癌的治療和控制術(shù)后轉(zhuǎn)移上取得了較大的進(jìn)展，肺癌患者的生存質(zhì)量和總體存活率仍不甚理想?；熓悄壳芭R床上治療肺癌的主要手段，其目的是阻止腫瘤生長和術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)，但治療的同時(shí)也存在著毒副作用大、腫瘤易產(chǎn)生多藥耐藥等缺陷。中醫(yī)藥治療腫瘤強(qiáng)調(diào)從整體角度出發(fā)，調(diào)節(jié)機(jī)體微環(huán)境，具有毒副作用小、患者生存質(zhì)量改善明顯、患者生存期延長顯著、可降低放化療藥物

2、的毒性及防治腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等多重作用，在中晚期癌癥患者治療中優(yōu)勢突出，已成為開發(fā)新型抗腫瘤藥物的重要資源。
　　川楝子作為中藥材在我國古代醫(yī)學(xué)著作中早有記載，其抗腫瘤作用時(shí)有報(bào)道，但其抗腫瘤作用并不確切，其抗腫瘤機(jī)制尚不明確。鑒于中藥抗腫瘤具有多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，本課題研究的目的是考察川楝子水煎液對肺癌細(xì)胞及動物肺癌模型的抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移作用，并初步探討其可能的機(jī)制。
　　在本課題中，體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測不同濃度

3、川楝子水煎液對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞和人肺癌A549細(xì)胞增殖的影響，采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)法檢測川楝子水煎液對A549細(xì)胞遷移能力的影響，采用吖啶橙染色法及MDC染色法檢測川楝子水煎液對細(xì)胞自噬的影響；采用western blot法檢測川楝子水煎液對A549肺癌細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3和Beclin1表達(dá)的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用小鼠Lewis肺癌皮下移植模型、烏拉坦誘導(dǎo)的小鼠肺癌模型和小鼠Lewis肺癌術(shù)后轉(zhuǎn)移模型評價(jià)川楝子水煎液的抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移作

4、用，通過監(jiān)測實(shí)驗(yàn)小鼠的狀態(tài)、體重、體溫、生存期和自主活動次數(shù)評價(jià)實(shí)驗(yàn)小鼠的生存質(zhì)量；通過HE染色法觀察實(shí)驗(yàn)小鼠肺組織病理變化；通過檢測血清中超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和免疫球蛋白G（IgG）的表達(dá)水平評價(jià)川楝子水煎液對實(shí)驗(yàn)小鼠免疫能力的影響；通過免疫組化法檢測川楝子水煎液對增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)的影響，初步探討其抗肺癌的機(jī)制。
　　體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：川楝子水煎液呈劑量依賴性抑制Lewis肺癌細(xì)胞

5、和A549肺癌細(xì)胞增殖，降低A549細(xì)胞的遷移能力，并減少腫瘤細(xì)胞低血清自噬。Western blot結(jié)果顯示，川楝子水煎液可明顯下調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3及Beclin1的表達(dá)。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與模型組相比，川楝子水煎液高劑量和低劑量對Lewis肺癌皮下移植腫瘤、烏拉坦誘導(dǎo)的小鼠肺癌均有治療效果，對Lewis肺癌術(shù)后轉(zhuǎn)移模型具有抗轉(zhuǎn)移作用。川楝子水煎液可減緩腫瘤生長速度、延長荷瘤小鼠存活時(shí)間、維持實(shí)驗(yàn)小鼠體溫恒定，顯示提高小

6、鼠生存質(zhì)量作用。川楝子水煎液還可減少Lewis肺癌皮下移植小鼠、烏拉坦誘導(dǎo)的肺癌小鼠血清中 hs-CRP、IL-6的表達(dá)，增加 Lewis肺癌術(shù)后轉(zhuǎn)移小鼠血清中IgG的表達(dá)。
　　病理結(jié)果顯示：與模型組相比，川楝子水煎液高低劑量組均能明顯改善致癌小鼠肺組織病理變化。免疫組化結(jié)果顯示：川楝子水煎液高低劑量組均能下調(diào)致癌小鼠肺組織中PCNA的顯色密度。
　　綜上所述，川楝子水煎液對小鼠肺癌有確切的抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移作用，其機(jī)制可能與