Neuregulin對(duì)快速起搏所致猴心衰的治療作用及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的一種綜合癥，主要是指心肌收縮力下降使心排血量不能滿足機(jī)體代謝的需要，器官、組織血液灌注不足，同時(shí)出現(xiàn)肺循環(huán)和(或)體循環(huán)淤血的表現(xiàn)。心力衰竭是多種心臟疾病的終末期表現(xiàn)，死亡率較高，是全世界關(guān)注的健康問(wèn)題。尋找能夠改善心力衰竭癥狀、血流動(dòng)力學(xué)狀況和預(yù)后的新療法新藥物是臨床醫(yī)生的愿望也是新藥開(kāi)發(fā)者的追求目標(biāo)。Neuregulins是一種血

2、管內(nèi)皮來(lái)源的上皮生長(zhǎng)因子，是酪氨酸激酶受體家族(ErbB)的激動(dòng)劑。國(guó)內(nèi)外研究表明，Neuregulins-ErbB信號(hào)系統(tǒng)在心臟發(fā)育過(guò)程和心肌對(duì)病理生理負(fù)荷或損傷的適應(yīng)機(jī)制中都發(fā)揮重要作用，在心力衰竭中可能也起重要作用。外源性Neuregulins的生物治療方法已經(jīng)在大鼠模型中觀察到了明顯的改善作用，研究Neuregulins在靈長(zhǎng)類動(dòng)物心力衰竭模型中的治療作用，探索其可能的作用機(jī)制對(duì)深入研究心力衰竭的分子發(fā)病機(jī)理和開(kāi)發(fā)新型的心力衰竭

3、治療藥物都有重要意義。 目的： 研究ErbB受體與蛋白激酶B在心力衰竭發(fā)生機(jī)制中的作用。研究重組人Neureguline對(duì)快速起博所致心力衰竭恒河猴心肌收縮能力的影響，探討Neuregulin對(duì)快速起搏所致猴心衰心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。 方法： 成年雄性恒河猴24只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、心力衰竭組及Neureguline治療組，每組8只。治療組240次/min起博7day后，起博狀態(tài)下連續(xù)10

4、d，每d 1次靜脈注射給予重組人Neureguline 3μg/kg，心力衰竭組給予同體積生理鹽水。連續(xù)給藥10d結(jié)束后，測(cè)定左室內(nèi)壓最大上升速率(Lvdp/dtmax)、左心室舒張末期壓(LVEDP)、左心室收縮末期壓(LVSP)等血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；測(cè)定射血分?jǐn)?shù)(EF)，每搏輸出量(SV)、室間隔搏動(dòng)幅度(IVS)等超聲心動(dòng)圖指標(biāo)；采用電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法觀察腦鈉肽(BNP)含量；通過(guò)nINEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)；采用實(shí)時(shí)熒光定量P

5、CR的方法分析肌球蛋白重鏈(α-MyHC)的表達(dá)水平；采用RT-PCR方法測(cè)定ErbB<,2>、蛋白激酶B(PKB)、Bcl-x1、Glut1mRNA表達(dá)水平；采用Western Blotting法檢測(cè)蛋白激酶B活性(phospho-PKB，即磷酸化蛋白激酶B蛋白水平)及凋亡相關(guān)基因Bcl-x1蛋白水平。 結(jié)果： 1.快速起搏誘導(dǎo)心力衰竭模型恒河猴心肌收縮能力顯著下降，心衰標(biāo)志物腦鈉肽水平明顯上升(p<0.05)。與對(duì)照

6、組比較ErbB<,2>、PKB、Bcl-x1、Glut1 mRNA表達(dá)水平明顯下降(p<0.05)，同時(shí)心肌組織蛋白激酶B活性顯著下降，Bcl-x1蛋白水平也明顯下降(p<0.05)。 2.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg.kg<'-1>重組人Neuregulin后，左室內(nèi)壓最大上升速率(Lvdp/dtmax)顯著升高，心衰標(biāo)志物腦鈉肽水平明顯降低。 3.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg.kg<'-1>重組人

7、Neuregulin后，α-MyHC表達(dá)水平明顯上調(diào)。 4.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin后，快速起搏誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡受到明顯抑制；同時(shí)心肌組織蛋白激酶B活性顯著增強(qiáng)，Bcl-xl蛋白水平也明顯增加。 5.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin后，心肌組織蛋白激酶BmRNA表達(dá)及活性(磷酸化水平活性)顯著增強(qiáng)，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(

8、Glut1)mRNA水平明顯上調(diào)。 結(jié)論： 1.快速起搏所致猴心衰心肌細(xì)胞損傷的機(jī)制可能與ErbB<,2>，下游蛋白激酶B、凋亡抑制基因Bcl-x1、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(Glut1)表達(dá)水平下降有關(guān)。 2.靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin對(duì)快速起搏所致猴心衰心力衰竭有確切的治療作用。 3.重組人Neuregulin可能通過(guò)細(xì)胞膜上的酪氨酸激酶受體ErbB結(jié)合，向上調(diào)節(jié)α-MyHC