Neuregulin對快速起搏所致猴心衰的治療作用及其作用機制的研究.pdf

1、充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是各種心臟疾病導致心功能不全的一種綜合癥，主要是指心肌收縮力下降使心排血量不能滿足機體代謝的需要，器官、組織血液灌注不足，同時出現(xiàn)肺循環(huán)和(或)體循環(huán)淤血的表現(xiàn)。心力衰竭是多種心臟疾病的終末期表現(xiàn)，死亡率較高，是全世界關注的健康問題。尋找能夠改善心力衰竭癥狀、血流動力學狀況和預后的新療法新藥物是臨床醫(yī)生的愿望也是新藥開發(fā)者的追求目標。Neuregulins是一種血

2、管內(nèi)皮來源的上皮生長因子，是酪氨酸激酶受體家族(ErbB)的激動劑。國內(nèi)外研究表明，Neuregulins-ErbB信號系統(tǒng)在心臟發(fā)育過程和心肌對病理生理負荷或損傷的適應機制中都發(fā)揮重要作用，在心力衰竭中可能也起重要作用。外源性Neuregulins的生物治療方法已經(jīng)在大鼠模型中觀察到了明顯的改善作用，研究Neuregulins在靈長類動物心力衰竭模型中的治療作用，探索其可能的作用機制對深入研究心力衰竭的分子發(fā)病機理和開發(fā)新型的心力衰竭

3、治療藥物都有重要意義。 目的： 研究ErbB受體與蛋白激酶B在心力衰竭發(fā)生機制中的作用。研究重組人Neureguline對快速起博所致心力衰竭恒河猴心肌收縮能力的影響，探討Neuregulin對快速起搏所致猴心衰心肌細胞損傷的保護作用及其可能的機制。 方法： 成年雄性恒河猴24只，隨機分為假手術組、心力衰竭組及Neureguline治療組，每組8只。治療組240次/min起博7day后，起博狀態(tài)下連續(xù)10

4、d，每d 1次靜脈注射給予重組人Neureguline 3μg/kg，心力衰竭組給予同體積生理鹽水。連續(xù)給藥10d結(jié)束后，測定左室內(nèi)壓最大上升速率(Lvdp/dtmax)、左心室舒張末期壓(LVEDP)、左心室收縮末期壓(LVSP)等血流動力學指標；測定射血分數(shù)(EF)，每搏輸出量(SV)、室間隔搏動幅度(IVS)等超聲心動圖指標；采用電化學發(fā)光免疫測定法觀察腦鈉肽(BNP)含量；通過nINEL法檢測心肌細胞凋亡指數(shù)；采用實時熒光定量P

5、CR的方法分析肌球蛋白重鏈(α-MyHC)的表達水平；采用RT-PCR方法測定ErbB<,2>、蛋白激酶B(PKB)、Bcl-x1、Glut1mRNA表達水平；采用Western Blotting法檢測蛋白激酶B活性(phospho-PKB，即磷酸化蛋白激酶B蛋白水平)及凋亡相關基因Bcl-x1蛋白水平。 結(jié)果： 1.快速起搏誘導心力衰竭模型恒河猴心肌收縮能力顯著下降，心衰標志物腦鈉肽水平明顯上升(p<0.05)。與對照

6、組比較ErbB<,2>、PKB、Bcl-x1、Glut1 mRNA表達水平明顯下降(p<0.05)，同時心肌組織蛋白激酶B活性顯著下降，Bcl-x1蛋白水平也明顯下降(p<0.05)。 2.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg.kg<'-1>重組人Neuregulin后，左室內(nèi)壓最大上升速率(Lvdp/dtmax)顯著升高，心衰標志物腦鈉肽水平明顯降低。 3.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg.kg<'-1>重組人

7、Neuregulin后，α-MyHC表達水平明顯上調(diào)。 4.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin后，快速起搏誘導的心肌細胞凋亡受到明顯抑制；同時心肌組織蛋白激酶B活性顯著增強，Bcl-xl蛋白水平也明顯增加。 5.起搏狀態(tài)下連續(xù)10天靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin后，心肌組織蛋白激酶BmRNA表達及活性(磷酸化水平活性)顯著增強，葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(

8、Glut1)mRNA水平明顯上調(diào)。 結(jié)論： 1.快速起搏所致猴心衰心肌細胞損傷的機制可能與ErbB<,2>，下游蛋白激酶B、凋亡抑制基因Bcl-x1、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(Glut1)表達水平下降有關。 2.靜脈注射給予3μg．kg<'-1>重組人Neuregulin對快速起搏所致猴心衰心力衰竭有確切的治療作用。 3.重組人Neuregulin可能通過細胞膜上的酪氨酸激酶受體ErbB結(jié)合，向上調(diào)節(jié)α-MyHC