釩配合物抑制PTP1B影響細胞磷酸化的初步研究.pdf

1、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)在細胞信號轉(zhuǎn)導和調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮重要作用,廣泛影響細胞各種代謝過程如細胞增殖、分化、遷移、凋亡、免疫應答等過程。PTPs的異常表達與許多疾病諸如糖尿病、癌癥、肥胖癥、類風濕、免疫功能紊亂等密切有關(guān)。PTP1B是一種胞內(nèi)蛋白質(zhì),是最早被發(fā)現(xiàn)和純化的蛋白酪氨酸磷酸酶。研究表明,PTP1B在胰島素受體以及瘦素受體信號通路中起著負調(diào)控作用。敲除PTP1B基因的小鼠對胰島素的敏感性以及高脂肪飲食下對肥胖癥的耐受性都得到了

2、很大的提高。因此,PTP1B成為糖尿病新藥設計的理想靶標,近年來,其抑制劑的研究受到人們廣泛的關(guān)注。釩化合物具有胰島素樣活性并能強烈抑制PTPs,PTP1B選擇性釩配合物可望發(fā)展成為低毒高效的抗糖尿病藥物。我們前期研究顯示氧釩配合物[VIVO(nbbb)(H2O)2](1)和[VIVO(bpmp)2](2)對PTP1B表現(xiàn)較好的選擇性,本文在此基礎上對其影響細胞磷酸化進行了初步研究,主要工作如下。
　　本文主要工作是運用蛋白免疫印

3、跡法檢測氧釩配合物(1)和(2)對三種腫瘤細胞(MCF-7、HepG-2和Hela)內(nèi)PTPs底物的磷酸化水平的影響進行探索。結(jié)果表明:氧釩配合物(1)能明顯增強 PTP1B作用底物 P-Src(Y529)、(IR/IGF1R)(PYPYPY115811621163)以及 P-EGFR(Y1092)磷酸化,而對 TCPTP作用底物P-Src(Y418)磷酸化的影響很小,特別是在MCF-7細胞中,且該配合物提高PTP1B作用底物磷酸化的能

4、力要明顯強于陽性對照VOSO4,表明這兩種釩配合物特別是(1)進入細胞仍然保持對 PTP1B的選擇性,而且不同的釩配合物對不同細胞的磷酸化影響不同,同一種配合物對不同細胞的作用也不同,為我們今后進一步篩選釩配合物抗糖尿病藥物提供了有益的信息。
　　此外,我們還研究了生物小分子釩配合物對蛋白酪氨酸磷酸酶的抑制作用和選擇性,結(jié)果顯示,大部分生物小分子氧釩配合物對PTP1B表現(xiàn)出強烈的抑制作用,化合物[VO(Phe)2]表現(xiàn)出最強的抑制