磷酸化IKK和磷酸化IκBα在糖尿病大鼠心肌組織中的表達(dá).pdf

1、目的： 觀察鏈脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠不同時(shí)期磷酸化IKK和磷酸化IkBα在心肌組織中的表達(dá)以及心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變，探討磷酸化IKK和磷酸化IkBα在糖尿病心肌病變發(fā)生、發(fā)展中的變化及作用。 方法： 選用近交、清潔級雄性Wistar大鼠48只，體重200-250g，隨機(jī)分成對照組(n=24只)、實(shí)驗(yàn)組(n=24只)。實(shí)驗(yàn)組腹腔注射STZ，72h后大鼠斷尾測血糖，血糖≥16.7mmol/L作為大鼠糖尿病模型建立標(biāo)

2、準(zhǔn)；對照組儀注射枸櫞酸緩沖液。各組于注射STZ或枸櫞酸緩沖液后4、8和12周各取8只大鼠，斷尾測血糖，麻醉后心臟取血、并于左心室同一部位切取心肌，分別測定血C肽、體重、心重指數(shù)和心肌細(xì)胞面積。切取心肌組織固定、包埋，制備病理切片和超薄切片，在光鏡和透射電鏡下觀察心肌組織的病理結(jié)構(gòu)改變，并用免疫組化和圖像分析系統(tǒng)檢測磷酸化IKK和磷酸化IkBα在心肌組織中的定位和半定量表達(dá)。 結(jié)果： 1．在實(shí)驗(yàn)期間，實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)明顯的多

3、尿、多飲、多食、體重下降。對照組體重正常增長，在第4、8、12周時(shí)二者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組大鼠血糖持續(xù)保持高水平，C肽持續(xù)保持低水平，而對照組始終正常，實(shí)驗(yàn)組與對照組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。且12周實(shí)驗(yàn)組大鼠心重指數(shù)與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.01)；8周、12周實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌細(xì)胞面積與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。 2．光鏡下，與對照組心肌細(xì)胞相比，實(shí)驗(yàn)組8周心肌細(xì)胞肥大、疏松

4、樣變、肌原纖維斷裂，12周心肌細(xì)胞外間質(zhì)增加，纖維化明顯。電鏡下，對照組糖尿病大鼠心肌細(xì)胞中，肌絲排列整齊，明暗各帶清晰，線粒體結(jié)構(gòu)清晰、排列規(guī)整。實(shí)驗(yàn)組心肌細(xì)胞肌絲排列稀疏、有斷裂，線粒體腫脹、變形，嵴排列紊亂，部分線粒體破裂。隨著病程進(jìn)展，病變逐漸加重。 3．免疫組化半定量分析顯示，實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織磷酸化IKK的表達(dá)逐漸增多，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織磷酸化IkBα的表達(dá)與對照組比較有統(tǒng)計(jì)