樹(shù)莓化學(xué)成分及其抗氧化活性和PTP1B抑制活性的研究.pdf

1、目的：考察新疆樹(shù)莓不同萃取部位對(duì)蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）的抑制作用及抗氧化活性，探尋具有抗氧化及PTPIB抑制活性的有效部位。研究樹(shù)莓葉片在一年不同時(shí)期總黃酮、總多酚含量變化，探討其變化規(guī)律及抗氧化活性。考察不同因素對(duì)樹(shù)莓莖黃酮提取率和抗氧化活性的影響，確定樹(shù)莓莖黃酮的最佳提取工藝。利用精確地分子量測(cè)定及特征碎片分析鑒定了16個(gè)黃酮類(lèi)化合物，包括4個(gè)槲皮素類(lèi)黃酮，2個(gè)木犀草素類(lèi)黃酮，8個(gè)山奈酚類(lèi)黃酮和2個(gè)異鼠李素類(lèi)黃酮。

2、>　　方法：采用乙醇提取、分步萃取的方法制備樹(shù)莓極性部位。測(cè)定各極性部位總黃酮，果實(shí)提取物經(jīng)AB-8大孔樹(shù)脂純化后得到了花青素部位；利用ABTS法、DPPH法及PTP1B抑制活性實(shí)驗(yàn)比較了不同部位的相關(guān)活性。測(cè)定了不同時(shí)期的樹(shù)莓葉乙醇提取物總黃酮含量及抗氧化活性。確定了不同溶劑、乙醇濃度、溫度、時(shí)間、料液比、粒徑等因素對(duì)樹(shù)莓莖黃酮得率和抗氧化活性的影響。得到了樹(shù)莓莖的最佳提取條件。運(yùn)用高效液相色譜-四級(jí)桿飛行時(shí)間的串聯(lián)質(zhì)譜法鑒定了樹(shù)莓葉

3、的黃酮類(lèi)化合物。
　　結(jié)果：經(jīng)AB-8大孔樹(shù)脂純化后，樹(shù)莓果實(shí)花青素含量由12.72±0.14 mg?g-1提高到238.13±1.18 mg?g-1，其抗氧化活性和PTP1B抑制活性也顯著升高。樹(shù)莓葉乙酸乙酯部位總黃酮含量最高，為456.86±0.70mg?g-1；樹(shù)莓乙酸乙酯部位抗氧化活性最高，清除ABTS和DPPH能力分別為3.22±0.02和2.95±0.01 Trolox當(dāng)量（mmol Trolox?g-1）；樹(shù)莓果實(shí)花

4、青素部位對(duì)PTP1B的抑制率最高，IC50為0.22±0.04μg?mL-1。樹(shù)莓葉片中總黃酮、總多酚的含量在一年中總體呈上升趨勢(shì)。其中，樹(shù)莓葉在5月份總黃酮、總多酚含量均最小，分別為2.116 mg/g和38.279 mg/g，在10月份總黃酮、總多酚含量均最高，分別為2.934 mg/g和53.491 mg/g。樣品總黃酮含量、總多酚含量、DPPH清除率三者之間具有一定的相關(guān)性。確定了樹(shù)莓莖的最佳提取工藝：70℃、45min、80％

5、乙醇、1:40料液比。研究樹(shù)莓莖黃酮純化條件，發(fā)現(xiàn)AB-8大孔樹(shù)脂純化之后的效果最好，純化之后黃酮含量顯著提高。鑒定的16種樹(shù)莓葉黃酮類(lèi)化合物中，3和4，6和7，15和16是具有不同苷元和不同糖基的異構(gòu)體；化合物8，9和10是具有相同苷元和糖基但取代基位置不同的異構(gòu)體；化合物11和12是苷元相同糖基不同的異構(gòu)體；化合物2，8，9，10具有相同的葡萄糖醛酸取代基。
　　結(jié)論：樹(shù)莓不同萃取部位均具有良好的抗氧化活性和PTP1B抑制作用