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文檔簡介
1、目的:原發(fā)性肝癌惡性程度高,發(fā)展迅速,難以治愈,因此在深入了解其發(fā)生機制的基礎(chǔ)上尋找新的治療手段十分必要.分子伴侶Hsp90能夠維持一系列在惡性腫瘤中起重要作用的蛋白質(zhì),特別是信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)中蛋白激酶的正確折疊、穩(wěn)定存在以及生物活性.該實驗通過以特異性抑制劑格爾德霉素(Geldanamycin,GA)抑制Hsp90功能的方法研究Hsp90在肝癌細胞中的作用,在此基礎(chǔ)上探討以Hsp90為靶點的藥物應用于肝癌治療的可能性.方法:培養(yǎng)人肝癌細胞
2、株HepG2,采用Western印跡雜交法檢測GA作用后HepG2細胞內(nèi)蛋白激酶B/Akt磷酸化狀態(tài)的變化、MTT法檢測細胞的活力,并應用流式細胞術(shù)分析細胞周期與凋亡;MTT法檢測單獨應用絲裂霉素(mitomycin,MMC)或者將其與GA聯(lián)合應用時對HepG2細胞的抑制情況、計算兩藥相互作用指數(shù),同時采用流式細胞術(shù)分析這兩種情況下細胞凋亡率的變化.結(jié)論:在肝癌細胞中Hsp90可以通過增強信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)中蛋白激酶的穩(wěn)定性而維持癌細胞的生長
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