Nogo-A對磷酸化蛋白激酶B在PC-12細胞表達的影響.pdf

1、目的：用Nogo-A干預(yù)分化后的PC-12細胞，觀察其細胞內(nèi)磷酸化蛋白激酶B(protein kinaseB，PKB)表達情況，探討Nogo-A抑制中樞神經(jīng)再生的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中是否有PKB的參與。 方法：將培養(yǎng)的細胞分成三組。對照組1：PC-12細胞經(jīng)高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)12天；對照組2：PC-12細胞經(jīng)含神經(jīng)生長因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)10天后，高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)2天；試驗組：PC

2、-12細胞經(jīng)含神經(jīng)生長因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)10天，高糖型DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)2天后，加入Nogo-A干預(yù)。實驗組又分別根據(jù)加入Nogo-A的濃度和干預(yù)時間分2個小組。實驗組1分別加入50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L終濃度的Nogo-A干預(yù)30min，實驗組2加入200nmol/L終濃度的Nogo-A分別干預(yù)10min,30min,90min。應(yīng)用蛋白印跡方法檢測Nogo-A干預(yù)后