地塞米松當(dāng)歸多糖前體藥的合成及其結(jié)腸靶向遞藥研究.pdf

1、目的：探討當(dāng)歸多糖提取、分離、純化的工藝，優(yōu)化地塞米松琥珀酸單酯及地塞米松當(dāng)歸多糖前體藥的合成工藝，考察前體藥的結(jié)腸靶向遞藥特性，促進(jìn)地塞米松結(jié)腸靶向前體藥的研發(fā)。 方法： 1.新鮮岷縣當(dāng)歸經(jīng)80％無水乙醇回流提取除去脂溶性成份，水提醇沉提取當(dāng)歸粗多糖，采用反復(fù)凍融等工藝處理當(dāng)歸粗多糖，超濾法分離當(dāng)歸多糖組分，分析各組分總糖含量及蛋白含量。 2.以4-DMAP為催化劑，將地塞米松(DEX)與琥珀酸酐反應(yīng)制備地塞米

2、松琥珀酸單酯。以琥珀酸酐的量(A，mmol)及4-DMAP的量(B)為影響因素，設(shè)計兩因素三水平的正交實驗，以目標(biāo)產(chǎn)品的收率作為判斷指標(biāo)，優(yōu)化地塞米松琥珀酸單酯的合成工藝。 3.以分離的當(dāng)歸多糖組分為載體合成地塞米松當(dāng)歸多糖前體藥，并以地塞米松琥珀酸單酯的量、羰基二咪唑和地塞米松琥珀酸單酯的摩爾比及三乙胺和羰基二咪唑的摩爾比為影響因素，設(shè)計三因素四水平的正交實驗，以所得產(chǎn)品的載藥量為考察指標(biāo)，優(yōu)化前體藥合成工藝，并建立合適的載藥

3、量測定方法。 4.將8mg前體藥與大鼠胃腸道不同部位內(nèi)容物稀釋液于37℃水浴孵育，分別于30、60、90、120、160min采樣，采用HPLC檢測地塞米松及地塞米松琥珀酸單酯在大鼠胃腸道不同部位內(nèi)容物稀釋液中的釋放。 結(jié)果： 1.反復(fù)凍融法除蛋白效果較好，但耗時較長；反復(fù)熱溶法亦能達(dá)到除蛋白效果，經(jīng)測定分子量大于300K當(dāng)歸多糖組分的蛋白含量小于1％。活性炭脫色效果較明顯，以加入2％為宜，但活性炭對當(dāng)歸多糖的收

4、率、總糖含量均有影響，且活性炭較難除去?；钚蕴棵撋に嚦瑸V分離的各組分多糖的總糖含量均小于50％。超濾過程中發(fā)現(xiàn)，色素部分主要含在10K以下的透淅液及300K以下的多糖組分中，300K以上組分顏色較好。以反復(fù)熱溶法除蛋白、超濾分離當(dāng)歸多糖工藝得到的當(dāng)歸多糖組分為類白色，總糖含量高達(dá)80％，收率為干當(dāng)歸的5.48％。 2.合成地塞米松琥珀酸單酯的正交實驗結(jié)果表明，當(dāng)?shù)厝姿闪恳欢ǖ那闆r下，4-DMAP的量為主要影響因素，琥珀酸酐的

5、量為次要因素；當(dāng)4-DMAP與琥珀酸酐的摩爾比大于0.75時，得不到產(chǎn)品的結(jié)晶；琥珀酸酐的量增大，有利于反應(yīng)進(jìn)行。最優(yōu)的合成條件為：地塞米松：琥珀酸酐：4-DMAP的摩爾比為1∶2∶0.5。合成的產(chǎn)物經(jīng)鑒定為目標(biāo)合成物，純度＞99％。 3.合成前體藥的正交實驗結(jié)果表明，當(dāng)歸多糖的量一定時，影響因素從大到小的次序依次為三乙胺、羰基二咪唑、地塞米松琥珀酸單酯。最優(yōu)合成條件為：當(dāng)歸多糖為1g時，地塞米松琥珀酸單酯2mmol，羰基二咪唑

6、3mmol，三乙胺4.5mmol。得到的前體藥載藥量高而且載藥量穩(wěn)定，為13％左右。 4.地塞米松當(dāng)歸多糖前體藥在胃、小腸近端、小腸遠(yuǎn)端、盲腸及結(jié)腸內(nèi)容物孵育液中均有DEX及DSH釋放，而在盲腸和結(jié)腸的內(nèi)容物中釋放的總量相對較大，在160min孵育時間內(nèi)，在結(jié)腸和盲腸內(nèi)容物中釋放的DEX和DSH總量是胃和小腸內(nèi)容物中釋放總量的1.95倍；結(jié)腸和盲腸內(nèi)容物孵育液中DEX及DSH的釋放量均與孵育時間相關(guān)，隨孵育時間的延長而逐漸增大。

7、 結(jié)論： 1.當(dāng)歸總多糖除蛋白后，用超濾法分離出不同分子量的當(dāng)歸多糖組分，此工藝穩(wěn)定，質(zhì)量可控，當(dāng)歸多糖中以分子量大于300K的組分為主，占干當(dāng)歸的5％以上。 2.合成地塞米松琥珀酸單酯的最佳工藝穩(wěn)定，地塞米松琥珀酸單酯的收率達(dá)98％，產(chǎn)品純度高，質(zhì)量穩(wěn)定。 3.優(yōu)化后的地塞米松當(dāng)歸多糖前體藥合成工藝，具有載藥量穩(wěn)定且載藥量較高的特點(diǎn)；大分子當(dāng)歸多糖組分(分子量＞300K)適合用作地塞米松前體藥的載體。