銀杏內(nèi)酯B前藥設(shè)計(jì)、合成及腦靶向性研究.pdf

1、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolide B，GB)是銀杏葉提取物中重要的活性成分，具有天然高效的血小板活化因子受體拮抗作用，以及顯著的抗腦缺血損傷作用。然而GB進(jìn)入腦部的含量有限，生物利用度不高，其腦靶向性還存在一定的提升空間。前藥策略常用于提高藥物的腦靶向性，具有安全性高，易于實(shí)現(xiàn)的優(yōu)點(diǎn)。因此，本文以GB為母核，系統(tǒng)進(jìn)行了前藥結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、虛擬篩選、合成表征以及腦靶向評價(jià)等相關(guān)研究，結(jié)果如下：
　　1.虛擬篩選結(jié)果提示：銀杏內(nèi)酯B-10-

2、O-煙酸酯(GBN)是一種成藥性較高，腦靶向性較優(yōu)的雙靶點(diǎn)GB前藥。
　　選取80種腦靶向性已知的化合物為訓(xùn)練集，5種分子描述符(分子體積(Mv)，脂水分配系數(shù)(logP)，極性表面積(PSA)，可旋轉(zhuǎn)鍵個(gè)數(shù)(NRB)和P－糖蛋白高親和力底物位點(diǎn)結(jié)合可能性(HAPSP))為變量，采用多元線性回歸構(gòu)建了廣義血腦屏障通透性預(yù)測模型。分子描述符重要性考察結(jié)果表明，HAPSP最為重要，其后分別為logP，NRB，PSA，Mv。
　　

3、借助廣義血腦屏障通透性預(yù)測模型以及OSIRIS Property Explorer成藥系數(shù)評估軟件，對初步設(shè)計(jì)的6種GB前藥(銀杏內(nèi)酯B-10-O-乙酸酯，銀杏內(nèi)酯B－10-O-苯甲酸酯，銀杏內(nèi)酯B－10-O-煙酸酯，銀杏內(nèi)酯B-10-O-5-甲基吡嗪－2羧酸酯，銀杏內(nèi)酯B-10-O-肉桂酸酯和銀杏內(nèi)酯B-10-O-阿魏酸酯)進(jìn)行了虛擬篩選。結(jié)果表明：銀杏內(nèi)酯B－10-O-煙酸酯成藥得分值最高，且預(yù)測血腦屏障通透性優(yōu)于原藥GB；此外煙酸

4、具有一定的藥理活性，與GB結(jié)合形成雙靶點(diǎn)前藥，在生物體內(nèi)可以起到協(xié)同治療作用。
　　2.合成出目標(biāo)前藥GBN，并確證其結(jié)構(gòu)。
　　以GB和煙酸為原料，乙腈為溶媒，1－(3－二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和4-二甲氨基吡啶分別為脫水劑和催化劑，合成前藥GBN。借助質(zhì)譜、紅外光譜以及核磁共振分析，確認(rèn)合成產(chǎn)物即為目標(biāo)前藥。
　　3.確認(rèn)GBN腦靶向性優(yōu)于原藥GB，其藥物靶向指數(shù)計(jì)算值為7.50。
　　建立并驗(yàn)

5、證了GBN和GB在大鼠腦勻漿中的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)同步檢測方法，然后利用該方法考察了靜脈注射前藥GBN或原藥GB后，藥物在腦部的藥動(dòng)學(xué)規(guī)律。結(jié)果表明，與注射原藥GB相比，大腦中GBN分解的GB消除速率較慢，濃度相對較高。經(jīng)3P97軟件計(jì)算發(fā)現(xiàn)，GBN、GBN分解的GB以及原藥GB在腦勻漿中的藥動(dòng)學(xué)均符合二室模型；腦勻漿中GBN分解的GB的消除半衰期，平均駐留時(shí)間以及曲線下面積分別是原藥GB的5.03，5.76和2.45

6、倍，而原藥GB在腦部的清除率是GBN分解的GB的1.96倍，說明GBN分解的GB在腦內(nèi)具有一種緩釋的作用。GBN藥物靶向指數(shù)的計(jì)算值為7.50，說明與原藥GB相比，前藥GBN的腦靶向性得到提高。
　　4.在血漿中，GBN分解的GB的消除半衰期(121.73 min)大于原藥GB的消除半衰期(77.61 min)，證明GBN具有長效作用。
　　建立并驗(yàn)證了GBN和GB在大鼠血漿中的LC-MS/MS同步檢測方法，然后利用該方法考