銀杏內(nèi)酯B孿藥腦靶向性和藥效機(jī)制研究.pdf

1、銀杏內(nèi)酯B(GB)是天然產(chǎn)物中最有效的血小板活化因子(PAF)受體拮抗劑，作者所在工程研究中心前期開(kāi)發(fā)的GB注射液對(duì)缺血性腦血管病(ICVD)具有良好療效。鑒于GB的腦靶向性尚存提升空間，工程中心根據(jù)ICVD的“損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)”機(jī)理，以GB為母核，引入具鈣離子拮抗活性的分子T，設(shè)計(jì)合成了雙靶點(diǎn)GB-T孿藥(TGB)，期待TGB在發(fā)揮PAF受體和鈣離子拮抗活性的同時(shí)能提高GB的腦靶向性。為驗(yàn)證和改進(jìn)TGB設(shè)計(jì)，本文圍繞TGB的腦靶向性及藥效

2、機(jī)制進(jìn)行了研究，主要結(jié)果如下:
　　 1.TGB經(jīng)酯酶分解方有拮抗PAF受體和Ca2+的作用。
　　 (1)TGB在血漿中酯酶的作用下可快速解離出GB和T，降解反應(yīng)符合表觀一級(jí)反應(yīng)，降解方程為InC=-0.0952t+2.8297(r2=0.9874)，降解半衰期t1/2為3.16min。
　　 (2)TGB、GB和聯(lián)合用藥(GB+T)溶液在體外能濃度依賴(lài)地抑制PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集，其IC50值分別為8.83

3、、8.58、8.36μmol·L-1，無(wú)顯著性差異。
　　 (3)TGB、GB和GB+T溶液在體內(nèi)可劑量依賴(lài)地抑制PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集，低劑量組的抑制率分別為42.24、43.32和41.43％，高劑量組的抑制率分別為58.03、58.31和58.85％，活性基本相當(dāng)。
　　 (4)經(jīng)生物大分子相互作用儀分析，TGB、GB與L型鈣離子通道蛋白均無(wú)結(jié)合;T、GB+T溶液與通道蛋白的KD值分別為16.46和14.19μm

4、ol·L-1，表明TGB拮抗Ca2+依賴(lài)于解離的T。
　　 2.TGB具腦靶向性，且主要得益于其較高脂溶性和對(duì)P-gp的強(qiáng)抑制作用。
　　 (1)大鼠分別注射TGB和GB后，以腦部GB計(jì)，治療有效性TAGB為6.87，顯示TGB具顯著腦靶向性。
　　 (2)經(jīng)測(cè)定，TGB脂水分配系數(shù)高于GB（logPTGB=1.03＞logPGB=0.61），脂溶性增強(qiáng)有助于通過(guò)血腦屏障。
　　 (3)據(jù)分子對(duì)接計(jì)算，T

5、GB、GB和T三者中，TGB與P-gp的親和力最大，能有效抑制P-gp對(duì)GB和T的外排作用，從而升高腦內(nèi)GB和T的總含量。
　　 3.TGB給藥優(yōu)于GB單獨(dú)給藥和GB+T聯(lián)合給藥，且具長(zhǎng)效和緩釋作用。
　　 (1)TGB和GB+T的腦靶向性比較結(jié)果顯示，GB+T不具腦靶向性，TGB給藥(TAGB=6.87)優(yōu)于聯(lián)合用藥(TAGB=0.94)。
　　 (2)GB(rGB)在腦組織中的Cmax值相比原藥GB(GB0)

6、增加了1.89倍，t1/2分別是GB(GB+T)和GB0的5.14和3.33倍，CL相比于GB(GB+T)和GB0分別降低了5.70和5.36倍，表明TGB給藥可增加GB在腦部的峰值濃度，且呈現(xiàn)長(zhǎng)效緩釋的特征。
　　 (3)TGB給藥相比于GB給藥，其分解釋放之GB的AUC分布比例在腦中由1.86％升高至6.80％，在肝中由24.24％下降到16.31％，DTIGB(brain/liver)為2.32;相比于GB+T給藥，DTI