耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）耐藥性及耐藥表型與femA基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平的關(guān)系研究.pdf

1、目的：了解我院臨床分離的葡萄球菌對(duì)8種常用抗菌藥物的耐藥性和對(duì)苯唑西林不同表型的菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶情況；了解金黃色葡萄球菌femA表達(dá)水平與其對(duì)苯唑西林不同耐藥表型的關(guān)系，探尋耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)不同耐藥表型形成的機(jī)制，進(jìn)一步明確femABX家族在金黃色葡萄球菌對(duì)苯唑西林耐藥中發(fā)揮的作用。 方法：對(duì)四川大學(xué)華西醫(yī)院2003年10月-2004年2月從臨床分離到的135株葡萄球菌按NCCLS(NationalComm

2、itteeforClinicalLaboratoryStandards)推薦的瓊脂對(duì)倍稀釋法測(cè)定苯唑西林、萬(wàn)古霉素、去甲萬(wàn)古霉素、替考拉寧、克林霉素、阿米卡星、氧氟沙星、利福平8種抗菌藥物的最低抑菌濃度(minimalinhibitoryconcentration，MIC)；用Nitrocephin紙片法測(cè)定菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶情況，統(tǒng)計(jì)對(duì)苯唑西林不同耐藥表型的的葡萄球菌產(chǎn)酶率并分析表型與產(chǎn)酶率的相關(guān)性；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(realt

3、imefluorescentquantitativePCR)法，以組成型表達(dá)基因gyrB為內(nèi)參，檢測(cè)篩選出來(lái)的對(duì)苯唑西林不同耐藥表型的非產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶金黃色葡萄球菌株femA基因表達(dá)量，統(tǒng)計(jì)分析對(duì)苯唑西林不同耐藥表型的葡萄球菌femA表達(dá)水平與耐藥表型之間的關(guān)系。 結(jié)果：135株葡萄球菌包括83株金黃色葡萄球菌及52株凝固酶陰性的葡萄球菌，對(duì)苯唑西林耐藥率分別為68.67％、57.69％，對(duì)阿米卡星、左氧氟沙星、利福平、克林霉素

4、耐藥率介于1.48％到65.93％之間，對(duì)糖肽類抗生素敏感性為100％。MRSA產(chǎn)酶率為43.86％，其中高耐菌株94.73％，產(chǎn)酶率為39.62％，低耐菌株產(chǎn)酶率為75％(3/4)，MSSA產(chǎn)酶率為76.92％，MRCNS產(chǎn)酶率為43.33％，MSCNS產(chǎn)酶率為61.11％。以瑞士捐贈(zèng)實(shí)驗(yàn)菌株BB270為對(duì)照制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，異質(zhì)性耐藥株BB270表達(dá)量設(shè)為100％，femA缺失株BB308表達(dá)量為37.82％，重組株BB586表達(dá)量為2

5、40.50％，同質(zhì)性耐藥株COL表達(dá)量為862.61％。4株敏感株表達(dá)量介于0.00353％-29.92％，4株低耐株表達(dá)量介于0.00554％-310％，7株高耐株表達(dá)量介于13.88％-55000％。 結(jié)論：葡萄球菌對(duì)臨床常用的幾種藥物表現(xiàn)出多重耐藥，甲氧西林敏感株(methicillin-susceptiveStaphylococcus，MSS)對(duì)除糖肽類抗生素外的其余四種抗菌藥物的敏感性高于甲氧西林耐藥株(methici