基于線性聚乙二醇-刷狀聚谷氨酸嵌段共聚物的細(xì)胞色素C載體研究.pdf

1、近年來，生物技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展讓越來越多的多肽和蛋白藥物應(yīng)用到臨床治療中。然而，蛋白藥物分子量大，難于進(jìn)入細(xì)胞且具有免疫原性；蛋白藥物的穩(wěn)定性差，在體內(nèi)外環(huán)境可能經(jīng)受多種復(fù)雜的化學(xué)降解和物理變化而失活。利用載體將蛋白藥物完整有效地轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞并保持其生物活性是蛋白質(zhì)藥物應(yīng)用的關(guān)鍵步驟之一。基于此，本文設(shè)計(jì)并合成基于刷狀聚谷氨酸的一系列嵌段共聚物，以細(xì)胞色素C為模型蛋白藥物，研究嵌段共聚物對(duì)蛋白藥物的體外裝載和釋放，并研究共聚物載體/細(xì)胞色素

2、C復(fù)合物對(duì)Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用和細(xì)胞凋亡。
　　本研究首先設(shè)計(jì)并合成以聚乙二醇為線性嵌段、以接枝于線性聚谷氨酸的聚谷氨酸刷為刷狀嵌段的目標(biāo)共聚物 PEG-b-(PELG-g-PLGA)，同時(shí)合成線性聚乙二醇-線性聚谷氨酸嵌段共聚物PEG-b-PLGA用作對(duì)照共聚物。通過改變刷狀聚谷氨酸長(zhǎng)度和聚乙二醇端基葉酸化對(duì)目標(biāo)共聚物結(jié)構(gòu)進(jìn)行了調(diào)節(jié)。目標(biāo)共聚物及其中間產(chǎn)物均經(jīng)1H NMR、GPC和FT-IR等手段進(jìn)行表征。在生理pH條件下

3、，目標(biāo)共聚物帶負(fù)電的刷狀聚谷氨酸嵌段與帶正電的細(xì)胞色素C通過多重靜電作用復(fù)合形成聚離子復(fù)合物膠束，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞色素C的裝載。以刷狀聚谷氨酸為特征結(jié)構(gòu)單元的目標(biāo)共聚物顯著提高了細(xì)胞色素C的裝載穩(wěn)定性?？疾炝薖EG-b-(PELG-g-PLGA)/細(xì)胞色素C復(fù)合物對(duì)HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用和細(xì)胞凋亡。結(jié)果表明，與自由細(xì)胞色素 C和對(duì)照共聚物/細(xì)胞色素C復(fù)合物相比，目標(biāo)嵌段共聚物載體的使用顯著抑制了腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)；共聚物載體的葉酸修飾不但增強(qiáng)