聚乙二醇-聚己內酯共聚物膠束的細胞內在化作用研究.pdf

1、近年來，兩親性嵌段共聚物膠束作為一種新興的納米藥物載體，逐漸成為藥物傳遞體系(DDS)的研究熱點。但是，關于膠束進入細胞的具體機理的研究尚不充分。由于兩親性是形成嵌段共聚物膠束的先決條件，很有必要考察親疏水比例對細胞內在化的影響?；谏鲜鲅芯磕康?，本論文對聚醚-聚酯共聚物膠束的內在化行為進行了研究。
　　 首先，利用聚乙二醇單甲醚(mPEG)和ε-己內酯(ε-CL)單體成功合成了四種不同親疏水比例的兩親性聚醚-聚酯嵌段共聚物，并

2、成功在末端接枝上了熒光探針異硫氰酸熒光素(FITC)。通過傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)、核磁共振氫譜(1H-NMR)、凝膠滲透色譜(GPC)、X射線衍射(XRD)和臨界膠束濃度(CMC)的檢測結果可知，合成的嵌段共聚物具備了預期的化學結構和性質。更重要的是，接枝上FITC后并沒有對嵌段共聚物的成膠束的能力產(chǎn)生影響。
　　 其次，利用溶劑揮發(fā)法制備了四種不同親疏水比例的嵌段共聚物膠束及對應的熒光標記的共聚物膠束。接著用納米激光

3、粒度儀(DLS)、原子力顯微鏡(AFM)和酶標儀等實驗儀器對膠束的粒徑、Zeta電位、形貌、穩(wěn)定性及體外毒性等性質進行了表征，結果表明不同親疏水比例的膠束具有相同的球形形貌，十分相似的粒徑和Zeta電位，以及良好的穩(wěn)定性和生物相容性。
　　 然后，選用NIH-3T3成纖維細胞對膠束的內在化能力進行了考察。由熒光顯微鏡和ImageProPlus6.0軟件得到的半定量的結果證明，在3個小時的培養(yǎng)時間內，熒光標記的膠束具有與FITC相

4、當?shù)臒晒鈴姸龋瑥亩f明化學接枝并不會影響FITC的熒光性能，而且膠束具備良好的內在化能力。
　　 最后，重點考察了膠束通過內吞作用進入人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)或肝癌細胞(HepG2)的具體內在化方式。利用熒光顯微鏡和ImageProPlus6.0軟件進行了半定量分析，此外，利用流式細胞儀進行了定量分析。結果顯示，親水比例高的膠束更容易進入細胞;在HUVEC細胞中，細胞膜穴樣內陷介導的內吞和大胞飲作用表現(xiàn)出明顯的親疏水比例依