超聲介導(dǎo)微泡空化靶向傳輸系統(tǒng)促血管新生作用的初探.pdf

1、目的:該研究利用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及聲學(xué)造影技術(shù),以蛋白質(zhì)靶向微泡在組織水平探索超聲介導(dǎo)微泡空化靶向傳輸放射性核素標(biāo)記的大分子物質(zhì)BSA的可行性,以蛋白質(zhì)微泡、脂質(zhì)體微泡在細(xì)胞水平初步探索超聲介導(dǎo)微泡空化效應(yīng)促內(nèi)皮細(xì)胞報(bào)告基因轉(zhuǎn)染、表達(dá)的可能性;以自制脂質(zhì)體靶向微泡向大鼠梗塞心肌靶向傳輸自行構(gòu)建、克隆的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因VEGF<,165>,并在心肌梗塞動(dòng)物模型評(píng)價(jià)VEGF<,165>分子搭橋血管新生的效果;為超聲介導(dǎo)微泡空化靶向

2、傳輸系統(tǒng)的深入研究以及冠心病分子搭橋基因治療服務(wù)于臨床,奠定理論基礎(chǔ)和提供實(shí)踐經(jīng)驗(yàn).結(jié)論:1.證實(shí)以脂質(zhì)體微泡為重要技術(shù)組成和作用基礎(chǔ)的超聲介導(dǎo)微泡空化靶向傳輸系統(tǒng)能夠在細(xì)胞和組織水平靶向傳輸基因和大分子物質(zhì);2.以全氟顯蛋白質(zhì)微泡為傳輸媒介的超聲介導(dǎo)微泡空化靶向傳輸系統(tǒng)可傳輸大分子牛血清白蛋白,但未能有效靶向傳輸基因,其原因有待進(jìn)一步研究、探討;3.研制的脂質(zhì)體微泡部分理化性質(zhì)與白蛋白微泡全氟顯相似,在大動(dòng)物模型上證實(shí)靜脈注射后可使左

3、室心肌持續(xù)顯影,電鏡檢測(cè)部分脂質(zhì)體基因微泡可見裸DNA貼附或可能被包載于脂質(zhì)體微泡內(nèi)部;4.成功構(gòu)建、克隆血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因于重組質(zhì)粒pcDNA3.1<'->/VEGF<,121>及pcDNA3.1 <'-> /VEGF<,165>,VEGF<,165>構(gòu)建準(zhǔn)確無誤,并能成功表達(dá)促內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)和使大鼠梗塞心肌組織血管新生的生物活性.5.發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子一種新的剪接形式,系在VEGF<,165>的第三和第四外顯于之間插入一長(zhǎng)度為20bp的