PDLLA-β-TCP-PRGD-NGF復合材料誘導PC12細胞ERK1-2蛋白磷酸化表達的研究.pdf

1、通過自行設計的復合緩釋材料PDLLA/β-TCP/PRGD/NGF應用于神經(jīng)組織的修復，不僅能夠提供神經(jīng)再生的支架空間，而且還能緩慢釋放神經(jīng)生長因子(NGF)誘導神經(jīng)干細胞分化并激活內源性組織修復機制的發(fā)生。將該神經(jīng)導管材料應用于大鼠的坐骨神經(jīng)缺損實驗，電生理檢測結果顯示經(jīng)材料修復的神經(jīng)組織與自體移植的功能效果無明顯差異，組織學觀察結果表明新生的神經(jīng)纖維數(shù)量多，形態(tài)較規(guī)則。這些結果充分表明了復合材料PDLLA/β-TCP/PRGD/NG

2、F在神經(jīng)導管應用上的巨大前景，為進一步研究該材料在神經(jīng)修復過程中的誘導效應，從分子生物學的微觀角度深入論證材料中釋放的NGF在材料可誘導性因素中的主導作用是一個必要的研究環(huán)節(jié)。
　　 PDLLA/β-TCP/PRGD/NGF作為一種人工的導管材料在應用于神經(jīng)修復過程中有兩大作用：其一是提供一個神經(jīng)修復的支架空間，其二是通過材料向神經(jīng)缺損空間不斷釋放神經(jīng)生長因子等物質，并提供由此形成的具有誘導神經(jīng)再生的局部微環(huán)境。PC12細胞來源

3、于褐家鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤，在NGF持續(xù)刺激下可生成一種類交感神經(jīng)樣細胞，這種誘導特性被廣泛應用于神經(jīng)生物學的研究課題，NGF誘導PC12細胞分化的信號通路學說基本形成。制備材料體外浸提液可近似模擬體內形成的微環(huán)境，研究材料浸提液微環(huán)境誘導PC12細胞分化的信號通路對論證材料的可誘導性和組織再生的微觀機理具有重要意義。在NGF誘導PC12細胞作用的前期，采用ELISA和westernblot實驗均可檢測到分化過程中的關鍵蛋白因子ERK1/

4、2磷酸化水平明顯升高，前期的研究表明PC12細胞經(jīng)PDLLA/β-TCP/PRGD/NGF材料浸提液誘導后能夠分化并產生軸突，本課題即采用這兩種實驗方法實時檢測浸提液誘導PC12細胞ERK1/2磷酸化水平的變化，同時設置實驗對照組PDLLA/β-TCP/PRGD浸提液和陰性對照組即無任何處理的PC12細胞，實驗結果表明：浸提液在誘導PC12細胞分化的前20min能促使ERK1/2磷酸化水平的上升，且PDLLA/β-TCP/PRGD/NG