ERK蛋白磷酸化在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞缺氧-復(fù)氧后活化及增殖中的作用.pdf

1、徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文ERK蛋白磷酸化在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞缺氧復(fù)氧后活化及增殖中的作用姓名：竇長新申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：董瑞國201204徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文(分別標記為H8，H8R8，HSRl2，H8R24)的細胞，采用AnnexinV／碘化丙啶(PropidiumIodide，PI)雙染法應(yīng)用流式細胞儀測定細胞凋亡率。采用SPSS160統(tǒng)汁軟件包進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果1GFAP鑒定結(jié)果：GFAPDAPI(4’，6

2、diamidino2phenylindole)免疫熒光雙標顯示雙陽性細胞的胞質(zhì)為綠色，細胞核為藍色，結(jié)果顯示98％以上為陽性細胞，符合實驗要求。2Westernblot半定量檢測：非缺氧組ERK蛋白磷酸化水平較低，缺氧組細胞缺氧／復(fù)氧后各時間點ERK蛋白磷酸化水平較非缺氧組升高(尸005)。阻滯劑組ERK蛋白磷酸化水平較無阻滯劑組下降。3MTT法檢測細胞活力：缺氧組細胞隨時間延長，AC活力較非缺氧組降低的趨勢更加明顯，復(fù)氧12h后差異有

3、統(tǒng)計學(xué)意義(P001)；阻滯劑組較無阻滯劑組細胞活力下降，復(fù)氧12h后差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P005)。4Brdu免疫熒光檢測AC增殖：非缺氧組細胞未見染色，缺氧組細胞缺氧期未見染色，復(fù)氧后隨時間延長細胞核染色逐漸增多(P005)。阻滯劑組細胞復(fù)氧后各時間點較無阻滯劑組細胞核染色減少，隨時間延長，組間差異逐漸顯著，復(fù)氧48h時差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P001)。5ELISA法檢測TNFcc分泌：非缺氧組給予阻滯劑后較非缺氧無阻滯劑組比較差異不明顯

4、，缺氧組各時間點TNF0【的分泌較非缺氧組升高(PO05)，隨時間延長趨勢逐漸明顯，阻滯劑組與非阻滯劑組比較TNFQ的分泌增加，隨時間延長，差異更加顯著，在復(fù)氧24h后差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO01)。6AnnexinV／PI雙染測定細胞凋亡：非缺氧組細胞給予阻滯劑后凋亡率較無阻滯劑時無差異，缺氧組各時間點與非缺氧組比較細胞凋亡率升高(JPO05)，隨時間延長，升高趨勢逐漸明顯，給予U0126后細胞的凋亡率升高更加顯著，在復(fù)氧24h時差異有