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1、目的:膠質(zhì)瘤是成人最常見的和最具侵襲性的原發(fā)性惡性腦內(nèi)腫瘤,替莫唑胺是FDA批準(zhǔn)的一線化療藥物。免疫治療是目前除了手術(shù)、放療及化療的一種新的治療方式,其中PD1及其配體PD-L1在腫瘤免疫抑制中起重要作用。PDL1表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞的表面,包括膠質(zhì)瘤,且腫瘤中高表達(dá)的PDL1與腫瘤的免疫抑制和臨床預(yù)后密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)探索替莫唑胺化療聯(lián)合PD1抗體免疫治療在小鼠原位膠瘤模型中的治療效果。
方法:將小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株GL261立體定
2、向移植到C57BL/6小鼠的大腦皮層內(nèi)建立小鼠原位膠質(zhì)瘤模型,按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)法隨機(jī)分為四組:對(duì)照組;單用PD1抗體組;單用替莫唑胺治療組;替莫唑胺聯(lián)合PD1抗體組。PD1單抗治療劑量為200ug/次,TMZ治療劑量為50ug/kg,聯(lián)合治療組給予上述等量的PD1單抗及TMZ治療,對(duì)照組腹腔注射等量無(wú)菌生理鹽水。使用7.0T MRI及免疫組織化學(xué)評(píng)估各組小鼠建模治療后腫瘤大小改變情況,免疫組織化學(xué)評(píng)估腦腫瘤局部和脾臟內(nèi)CD4+、CD8+T
3、免疫細(xì)胞浸潤(rùn)情況,免疫印跡評(píng)估PDL1表達(dá)及分光光度法評(píng)估細(xì)胞凋亡,同時(shí)察各組小鼠總的生存期。
結(jié)果:替莫唑胺聯(lián)合PD1抗體治療較單一治療組明顯提高了原位小鼠膠質(zhì)瘤模型的生存期(x2=32.043,P<0.01);聯(lián)合治療后腫瘤病灶面積明顯減?。?lián)治組0.69±0.11mm2,對(duì)照組11.40±2.36mm2,F(xiàn)=42.771,P<0.01);聯(lián)合治療后小鼠腦腫瘤局部浸潤(rùn)的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞較對(duì)照組也明顯升高(聯(lián)治
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