Survivin基因在骨髓間充質(zhì)干細胞中的表達研究.pdf

1、目的: 本研究分離培養(yǎng)骨髓源間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)，檢測survivin基因在其中的表達情況，并分別通過紫外線照射及粒細胞集落刺激因子刺激后，觀察MSCs中survivin基因的表達變化，探討其意義。 方法: 應用Ficoll密度梯度離心法分離骨髓間充質(zhì)干細胞，LG-DMEM培養(yǎng)基，15％FBS培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中繪制細胞生長曲線，流式細胞術(shù)檢測其特異性表面標志，并用地

2、塞米松、胰島素、吲哚美辛誘導成脂，21天后油紅0染色照相，采用半定量RT-PCR法檢測MSCs中survivin基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達情況。并通過紫外線照射、G-CSF刺激等方法處理后，采用半定量RT-PCR法檢測其中survivin基因表達的變化。 結(jié)果: 原代和傳代培養(yǎng)MSCs均保持較強的增殖能力，細胞生長曲線提示第7天傳代細胞進入平臺期，流式細胞儀檢測示CD83、CD45、組織相容性抗原HLA-DR及干細胞表面標志

3、CD34無表達或極低表達，而CD44、CD13、CD71高表達，經(jīng)地塞米松等誘導后MSCs向脂肪細胞分化，RT-PCR結(jié)果顯示正常人骨髓間充質(zhì)干細胞中有survivin基因表達，并且分別經(jīng)過紫外線照射、G-CSF處理后人骨髓間充質(zhì)干細胞中survivin基因的表達量有不同程度的提高。 結(jié)論: Survivin基因不是癌細胞特異性抗凋亡蛋白，在正常人骨髓間充質(zhì)干細胞中有表達，并且通過紫外線照射、G-CSF刺激等處理后其表