細(xì)胞工程1

1、專題2　細(xì)胞工程第2節(jié)　動(dòng)物細(xì)胞工程第2課時(shí)　動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,欄目鏈接,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,1．概念：指________或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，又叫__________。2．過(guò)程：含有不同__________的兩個(gè)細(xì)胞―→________細(xì)胞。3．意義：克服了________雜交不親和的障礙。,兩個(gè),細(xì)胞雜交,遺傳信息,雜交,遠(yuǎn)緣,欄目鏈接,二、單克隆抗體,1．B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一個(gè)B淋巴細(xì)胞分泌______

2、__種特異性抗體；體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細(xì)胞________無(wú)限增殖。2．制備。,一,不能,雜交瘤細(xì)胞,能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,欄目鏈接,3．應(yīng)用：最廣泛的用途是用作__________________；用于____________；制成“生物導(dǎo)彈”，定向運(yùn)載藥物。,體外診斷試劑,治療疾病,欄目鏈接,欄目鏈接,知識(shí)點(diǎn)1 動(dòng)物細(xì)胞融合,1．概念：是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，又稱細(xì)胞雜交。2．原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)

3、性。3．誘導(dǎo)方法：物理法——離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法——聚乙二醇；生物方法——滅活的病毒。,,欄目鏈接,4．動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程(如下圖所示)。,,欄目鏈接,5．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。6．植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較。,欄目鏈接,7.已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例。,欄目鏈接,例1 動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是(　　)A．誘導(dǎo)融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所

4、采用的原理完全相同D．都能形成雜種細(xì)胞,欄目鏈接,解析：首先兩種細(xì)胞工程技術(shù)中都要進(jìn)行細(xì)胞融合，且融合的技術(shù)基本相同；第二，誘導(dǎo)的方法，除動(dòng)物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑外，其他的二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，最終形成的是雜種細(xì)胞，植物體細(xì)胞雜交除細(xì)胞膜的流動(dòng)性外，還有細(xì)胞的全能性，最終雜種細(xì)胞形成的是雜種植株。答案：D,欄目鏈接,1．以下四種細(xì)胞工程技術(shù)中，培育出的新個(gè)體(或

5、細(xì)胞)同時(shí)具有兩個(gè)親本遺傳特性的是(　　)①植物組織培養(yǎng)?、谥参矬w細(xì)胞雜交?、蹌?dòng)物細(xì)胞融合　④核移植A．①②③ B．①②④C．②③④ D．①③④,變 式遷 移,欄目鏈接,解析：①是通過(guò)細(xì)胞脫分化、再分化和有絲分裂形成新個(gè)體的過(guò)程，只具有一個(gè)親本遺傳特性。②③④不同程度地都具有雙親遺傳特性。答案：C,變 式遷 移,欄目鏈接,知識(shí)點(diǎn)2 單克隆抗體,1．

6、概念：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2．特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。3．制備過(guò)程(如下圖所示)。,欄目鏈接,,,,欄目鏈接,,在制備單克隆抗體時(shí)，需經(jīng)兩次篩選，但目的不同。(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融

7、合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。,,欄目鏈接,,(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來(lái)的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。,,欄目鏈接,,4．應(yīng)用。(1)診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物：運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)彈”

8、。(3)分離和純化抗原分子。,,欄目鏈接,例2 下列關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的敘述，正確的是(　　)A．制備過(guò)程中不需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點(diǎn)C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn)D．單克隆抗體制備過(guò)程中的細(xì)胞兩兩融合得到三種融合細(xì)胞,,欄目鏈接,解析：?jiǎn)慰寺】贵w的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)結(jié)合，得到雜交瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能

9、產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限繁殖但不具有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。經(jīng)過(guò)免疫的效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交獲得三種細(xì)胞：效應(yīng)B細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞融合形成的融合細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的融合細(xì)胞。答案：D,欄目鏈接,2．用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是(　　)A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B．用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與

10、小鼠骨髓瘤細(xì)胞C．用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D．篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體,變 式遷 移,欄目鏈接,解析：酶具有專一性，纖維素酶只能分解纖維素，用纖維素酶處理植物細(xì)胞是植物細(xì)胞工程中用來(lái)除去細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的方法，與動(dòng)物細(xì)胞工程無(wú)關(guān)。B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞無(wú)纖維素。答案：B,變 式遷 移,欄目鏈接,點(diǎn)評(píng)：(1)教材中提及的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上