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1、水稻鋸齒葉矮縮病毒?。≧ice ragged stunt virus,RRSV)是近幾年危害較為嚴(yán)重的水稻病害之一。該病害主要發(fā)生在東南亞、東亞和南亞的一些國(guó)家部分地區(qū),并且造成巨大的損失,最嚴(yán)重時(shí)節(jié)發(fā)病率100%。RRSV是呼腸孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒屬(Oryzavirus)的典型成員。從基因組的角度來(lái)說(shuō),RRSV由10條雙鏈RNA組成,并分別被命名為S1-S10,這10個(gè)基因分別編碼11種蛋白質(zhì)且功能各不相同。RR
2、SV的癥狀與水稻缺磷的癥狀十分相似,推測(cè)可能RRSV與水稻磷代謝具有相關(guān)性。
本課題首先通過(guò)田間實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論:RRSV發(fā)病水稻中無(wú)論是莖、葉部分的磷含量還是根部的磷含量均明顯低于健康水稻中相應(yīng)部位的磷含量。由此推測(cè)RRSV可能與水稻磷代謝有著一定的關(guān)系。其次我們挖掘了7個(gè)磷轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中的關(guān)鍵基因TRXH,PHR2,PSS1,PHO1,SPX1,SPX4,Os-MiR399,并用real-time PCR檢測(cè)了各個(gè)基因在病株和健株
3、中表達(dá)量的差異,結(jié)果顯示這7個(gè)基因在健康水稻中的表達(dá)量明顯高于感染RRSV的病株中的表達(dá)量。由此推測(cè)RRSV可能影響磷轉(zhuǎn)運(yùn)通路中各個(gè)基因的功能,使得水稻的磷代謝受阻,進(jìn)而導(dǎo)致水稻對(duì)磷的吸收量的降低。由于Os-MiR399是磷通路中最主要的基因,在磷通路過(guò)程中起著傳遞信號(hào)和接收信號(hào)的雙重作用,Os-MiR399功能的異常直接影響磷的代謝過(guò)程,最后本實(shí)驗(yàn)選用Os-MiR399的4個(gè)前體MiR399作為研究對(duì)象,進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn),將Os-MiR
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