水稻齒葉矮縮病初侵染源及其病原病毒的遺傳信息研究.pdf

1、水稻齒葉矮縮病是由植物呼腸孤病毒科（Reoviridae）水稻病毒屬（Oryzavirus）的水稻齒葉矮縮病毒（Rice ragged stunt virus，RRSV）引起的，是水稻上一種危害嚴(yán)重的病毒病害。本文從廣西大學(xué)農(nóng)場(chǎng)誘蟲燈下褐飛虱蟲口數(shù)量統(tǒng)計(jì)及其帶毒檢測(cè)、田間褐飛虱帶毒檢測(cè)、田間自生稻、再生稻及部分禾本科植物的帶毒檢測(cè)來初探該病的初侵染源。結(jié)果表明:水稻齒葉矮縮病的初侵染源主要有兩個(gè)方面:一是遷飛來的帶毒褐飛虱，二是本地越冬

2、后未完全死亡的染病自生稻、再生稻、玉米（Zea mays）、稗草(Echinochloacrusgalli)、光頭稗（Echinochloa colonum）和看麥娘(Alopecurus aequalis)等禾本科植物，其中光頭稗攜帶RRSV為首次報(bào)道。
　　 分別用褐飛虱長(zhǎng)翅型成蟲和短翅型成蟲進(jìn)行不同時(shí)間的傳毒試驗(yàn)，30 d后通過RT-PCR技術(shù)檢測(cè)水稻植株中的RRSV，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，褐飛虱長(zhǎng)翅型成蟲和短翅型成蟲的傳毒時(shí)間相差不

3、大，最短的傳毒時(shí)間均為30 min，長(zhǎng)翅型成蟲傳毒2-4 h時(shí)傳毒效率比較高，水稻植株帶毒率為10％，短翅型成蟲傳毒4h時(shí)傳毒效率比較高，水稻植株帶毒率為25％，隨著褐飛虱取食水稻的時(shí)間增長(zhǎng)，水稻感染RRSV的比率提高。
　　 根據(jù)自廣西大學(xué)農(nóng)場(chǎng)采集的水稻病毒病樣品的小RNA高通量測(cè)序所獲得的RRSV序列和Genbank上發(fā)表的RRSV基因組各片段的序列，分別設(shè)計(jì)RRSV基因組不同片段的特異性引物，利用RT-PCR的方法成功克隆

4、RRSV南寧分離物(RRSV-NN)基因組S5、S6、S7、S8和S10片段的全長(zhǎng)序列。經(jīng)Vector NTI11.05軟件分析得出RRSV-NN-S5RNA全長(zhǎng)序列2682 nts，含有1個(gè)ORF，編碼一個(gè)含808個(gè)氨基酸的蛋白;RRSV-NN-S6RNA全長(zhǎng)序列2158 nts，含有1個(gè)ORF，編碼一個(gè)含680個(gè)氨基酸的蛋白;RRSV-NN-S7RNA全長(zhǎng)序列1938 nts，含有1個(gè)ORF，編碼一個(gè)含608個(gè)氨基酸的蛋白;RRSV

5、-NN-S8RNA全長(zhǎng)序列1913 nts，含有1個(gè)ORF，編碼一個(gè)含596個(gè)氨基酸的蛋白;RRSV-NN-S10RNA全長(zhǎng)序列1162nts，含有1個(gè)ORF，編碼一個(gè)含296個(gè)氨基酸的蛋白。
　　 用Vector NTI11.05軟件分析RRSV-NN各片段與已報(bào)道的RRSV各地分離物核苷酸序列和氨基酸序列同一性，結(jié)果發(fā)現(xiàn):RRSV-NN基因組S5、S6、S7、S8、S10片段與已報(bào)道的各地RRSV相應(yīng)片段的核苷酸序列同一性分

6、別為94.4％-94.6％、98.2％-99.4％、96.4％-100％、98.2％-99.4％和99％-99.3％。與已報(bào)道的各地RRSV相應(yīng)片段編碼的氨基酸序列同一性分別為97.6％-97.9％、99.3％-99.6％、99.5％-99.6％、98.2％-99.7％、99.4％-99.7％。
　　 從RRSV的S5、S6、S7、S8和S10片段的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析來看，南寧分離物的每個(gè)片段展示出的與已經(jīng)報(bào)道的分離物的相應(yīng)片段存在