18498.半滑舌鰨amh基因的克隆及表達分析

1、上海海洋大學碩士學位論文碩士學位論文題目：目：半滑舌鰨半滑舌鰨AMH基因的克隆及表達分析基因的克隆及表達分析英文題目：英文題目：Antimullerianhmonegeneofthehalfsmoothtonguesole（Cynoglossussemilaevis）:cloningitsmRNAexpression專業(yè)：業(yè)：動物遺傳育種與繁殖研究方向：研究方向：分子遺傳育種姓名：名：劉姍姍指導教師：指導教師：陳松林二O一二年四月學校代

2、碼：10264研究生學號：M090107272上海海洋大學碩士學位論文I半滑舌鰨半滑舌鰨（Cynoglossussemilaevis）AMH基因的克隆及表達基因的克隆及表達分析分析摘要魚類性別相關基因的克隆與表達以及性別決定分子機制的研究是魚類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的需求，也是目前國際上急待攻克的重要科學問題。半滑舌鰨（Cynoglossussemilaevis）為我國特有經濟海水魚類，市場價值極高，同時它也是目前發(fā)現的雌雄生長差異最大的魚類之一。

3、半滑舌鰨又是一種存在天然性逆轉現象的雌雄異體魚類，且性別決定類型為ZW型。半滑舌鰨所具有的這些特點使其成為研究魚類性別決定機制、篩選性別（特別是雌性）特異決定基因，研究魚類性別分化和調控機制的理想材料和模型?？箍娎帐瞎芗に兀╝ntiMllerianhmone，AMH）也叫繆勒氏管抑制物（Mllerianinhibitingsubstance，MIS)是以多肽形式存在的細胞因子，屬于轉化生長因子β（TGFβ）超家族中的一員，廣泛分布于脊椎

4、動物和無脊椎動物中。AMH基因在雄性性腺分化期抑制繆勒氏管的形成，阻止雌性生殖器官的發(fā)育，而使中腎管發(fā)育成雄性生殖器官，是性別分化中的一個重要因子。自1986年Cate等首次從人類中克隆出該基因以來，一直受到極大關注?？箍娎帐瞎芗に鼗驌碛蠺GFβ超家族共有的標志性結構，即具有AMHN區(qū)域及TGFβ結構域，并且還含有該家族典型的9個保守的半胱氨酸殘基。本文以半滑舌鰨為研究對象，成功的獲得完整的AMH基因開放閱讀框（Openreading

5、frameF）、基因組及啟動子序列?；圉岮MH基因的開放閱讀框（F）長為1563bp，編碼520個氨基酸（不包括終止密碼子），擁有TGFβ超家族共有的標志性結構。擴增得到的基因組序列大小為2855bp，通過與開放閱讀框cDNA序列比對，發(fā)現半滑舌鰨AMH基因含有7個外顯子和6個內含子，與奧里亞羅非魚和斑馬魚的AMH結構相似。進化樹分析表明，與牙鲆（Paralichthysolivaceus）相似性最高為61.7%，其次為花鱸（Late