UUO幼年大鼠腎間質(zhì)微血管損傷趨勢(shì)及其相關(guān)分子特征.pdf

1、目的：探討單側(cè)輸尿管結(jié)扎模型(UUO)幼年大鼠腎間質(zhì)纖維化過程中局部微血管損傷趨勢(shì)及其特征分子血小板反應(yīng)蛋白(TSP-1)與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)組織定位表達(dá)和時(shí)相表達(dá)的趨勢(shì)、潛在的病理意義，并評(píng)價(jià)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)苯那普利和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)氯沙坦聯(lián)合干預(yù)的效應(yīng)。 方法：采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法制備實(shí)驗(yàn)性梗阻性腎小管間質(zhì)損傷模型(UUO模型)；3-4周齡幼年雄性Wistar大鼠96只，分為

2、正常對(duì)照組(32只)、UUO模型組(32只)、UUO模型治療組(32只)；于實(shí)驗(yàn)第1周、第2周、第3周、第4周每組各取8只大鼠，取病變腎臟石蠟包埋并切片；HE染色評(píng)價(jià)腎組織常規(guī)病理變化，免疫組化方法檢測(cè)大鼠腎組織CD34、TSP-1、VEGF的表達(dá)，探討各組大鼠CD34、VEGF、TSP-1腎組織定位表達(dá)和時(shí)相表達(dá)的趨勢(shì)，以及干預(yù)的影響。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果：①各組大鼠腎組織石蠟切片經(jīng)HE染色，光鏡下

3、觀察腎組織常規(guī)病理，結(jié)果提示：對(duì)照組腎臟結(jié)構(gòu)正常，腎小管排列緊密、整齊，小管基底膜光滑、連續(xù)，小管間質(zhì)區(qū)無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。UUO模型組術(shù)后第1周，腎間質(zhì)水腫，遠(yuǎn)端小管擴(kuò)張，腎小球結(jié)構(gòu)正常；術(shù)后第2周，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞局灶或彌漫性浸潤(rùn)，腎小管輕度擴(kuò)張；術(shù)后第3周，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞彌漫性浸潤(rùn)，局灶性加重，腎小管不同程度擴(kuò)張，小管細(xì)胞空泡變形、基底膜增厚斷裂，小管間質(zhì)區(qū)面積增大，腎間質(zhì)輕度纖維化；術(shù)后第4周，腎小管間質(zhì)病變繼續(xù)加重，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞仍

4、呈彌漫性浸潤(rùn)，腎小管大量塌陷，殘存小管細(xì)胞基底膜明顯斷裂、萎縮，腎間質(zhì)明顯纖維化。干預(yù)組與模型組同時(shí)間比較，腎小管間質(zhì)病變程度明顯減低(P＜0.05)。②免疫組化染色：CD34在腎小球毛細(xì)血管袢和腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，其免疫組化染色半定量分析：第1、2、3、4、周分別為：對(duì)照組：2.59±0.72、2.89±0.64、2.44±0.44、2.82±0.51；模型組：2.12±0.31、1.74±0.16、1.43±1.19、

5、1.09±0.15；干預(yù)組：2.78±0.28、2.37±0.38、2.09±0.28、1.71±0.19。隨試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，UUO模型組腎組織中CD34表達(dá)量及面積顯著遞減(P＜0．01)，干預(yù)組與模型組相比這種趨勢(shì)較緩(P＜0．05)。VEGF在腎小管上皮細(xì)胞胞漿中表達(dá)，其免疫組化染色半定量分析：第1、2、3、4、周分別為：對(duì)照組：2.97±0.853.21±0.57、3.11±0.76、3.04±0.55；模型組：2.52±0.9

6、1、1.76±0.66、1.39±0.71、1.05±0.69；干預(yù)組：2.69±0.94、2.46±0.45、2.21±0.40、2.00±0.61。隨試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，UU0模型組腎組織中VEGF表達(dá)量及面積第1周變化不顯著(P＞0．05)第2、3、4周顯著遞減(P＜0．01)，干預(yù)組下降趨勢(shì)不顯著(P＞0．05)。TSP-1蛋白主要表達(dá)于腎小球毛細(xì)血管袢、系膜基質(zhì)、腎小管間質(zhì)，其免疫組化染色半定量分析：第1、2、3、4、周分別為：對(duì)

7、照組：1.86±0.30、1.81±0.26、1.81±0.18、1.86±0.23；模型組：2.02±0.27、3.46±0.28、2.84±0.42、2.93±0.25；干預(yù)組：2.19±0.19、3.06±0.27、2.60±0.27、2.69±0.22。隨試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，UUO模型組腎組織中TSP-1表達(dá)量及面積顯著增加(P＜0．01)，其中以第2周達(dá)高峰，第3、4周這種趨勢(shì)漸緩，但仍明顯高于對(duì)照組，干預(yù)組這種變化趨勢(shì)明顯減輕。