慢腎康寧在UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化Wnt-β-catenin信號通路中的影響.pdf

1、目的:觀察慢腎康寧在UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化Wnt/β-catenin信號通路中的作用及其機制。
　　方法:60只Wistar雄性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,根據(jù)體重隨機分為正常組、假手術(shù)組、模型組、纈沙坦對照組、慢腎康寧高、低劑量組,每組10只。戊巴比妥鈉麻醉以后,模型組和各治療組在無菌條件下使左腎和輸尿管充分暴露,用4-0號絲線結(jié)扎左輸尿管的二端,并在二個線結(jié)之間剪斷以防逆行尿路感染,然后關(guān)閉腹腔,而假手術(shù)組在分離輸尿管后不結(jié)扎,直接

2、關(guān)閉腹腔,其余步驟相同。術(shù)后腹腔注射青霉素(10萬單位/只)用于預(yù)防感染,連續(xù)三天。術(shù)前1天開始灌胃,纈沙坦組予8mg/(kg-1.d-1)劑量灌胃,中藥組分別予30g/(kg-1.d-1)、15g/(kg-1.d-1)的劑量灌胃,各組連續(xù)灌胃12天,其余各組均以等量的生理鹽水灌胃。術(shù)后第12天處死各組大鼠,留取腎臟組織。用HE和Masson染色觀察腎組織的病理改變,免疫組化檢測E-cadeherin、β-catenin的蛋白表達(dá),Re

3、al-time PCR檢測Wnt4、β-catenin、ColⅢ mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:纈沙坦和慢腎康寧均能減輕UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化,HE和Masson染色顯示,正常組和假手術(shù)組無異常。與模型組比較,慢腎康寧組和纈沙坦組的左側(cè)腎臟的病理損傷得到明顯的改善,腎小管萎縮、塌陷、或擴張的情況好轉(zhuǎn),炎細(xì)胞浸潤較少,管腔內(nèi)細(xì)胞管型或蛋白管型少見,腎間質(zhì)纖維化面積縮小。Real-time PCR顯示,與模型組比較,各治療組的Wnt4、β

4、-catenin、ColⅢmRNA表達(dá)水平均顯著下降(P<0.01)。免疫組化顯示,與模型組比較,各治療組β-catenin蛋白表達(dá)顯著下降(P<0.01),而E-cadeherin蛋白表達(dá)則明顯升高(P<0.05)。
　　結(jié)論:UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化模型中Wnt/β-catenin信號通路被激活;慢腎康寧能抑制UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化模型中Wnt/β-catenin信號通路,下調(diào)Wnt4、β-catenin的表達(dá),并且上調(diào)E-ca