2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  采用單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)方法構(gòu)建大鼠腎間質(zhì)纖維化模型,以苯那普利為對(duì)照藥物,觀察中藥復(fù)方腎纖康顆粒對(duì)UUO模型大鼠腎功、腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)、腎間質(zhì)纖維化程度以及對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,探討腎纖康顆??鼓I間質(zhì)纖維化的作用及其機(jī)制。
  方法:
  將60只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(SOR組)、UUO模型組(UUO組)、UUO模型+苯那普利治療組(

2、洛汀新組)、UUO模型+腎纖康顆粒治療組(腎纖康組),每組15只。SOR組僅切開(kāi)腹腔而不結(jié)扎輸尿管,其余各組均構(gòu)建UUO模型,從術(shù)后第一天開(kāi)始給藥,腎纖康組給予腎纖康顆粒(4.2g/kg·d)灌胃治療,洛汀新組給予苯那普利(10mg/kg·d)灌胃治療,SOR組和UUO組給予等體積蒸餾水灌胃。分別于術(shù)后第7天、14天和21天每組隨機(jī)選擇5只大鼠處死,稱取大鼠腎重和體重,計(jì)算腎臟肥大指數(shù)(腎重/體重,KW/BW),檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量、

3、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、腎臟HE及Masson染色,采用免疫組織化學(xué)染色法和Western blot檢測(cè)腎組織Wnt4、β-catenin和α-SMA蛋白的表達(dá),Real time PCR檢測(cè)腎組織Wnt4、β-catenin和α-SMA mRNA的表達(dá)水平。
  結(jié)果:
  1.體重及KW/BW變化:與SOR組相比,其余各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)體重均減輕,而KW/BW升高(P<0.05);與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新

4、組體重各時(shí)間點(diǎn)均明顯升高,KW/BW在第7天和14天明顯降低(P<0.05),而在第21天較UUO組升高(P<0.05);腎纖康組和洛汀新組治療效果相當(dāng)(P>0.05)。
  2.24小時(shí)尿蛋白定量:每組大鼠各時(shí)間點(diǎn)24小時(shí)尿蛋白定量組內(nèi)比較和組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  3.腎功能指標(biāo):與SOR組相比,其余各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)Scr和BUN均有不同程度升高(P<0.05);與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新組

5、Scr和BUN水平均明顯降低(P<0.05);腎纖康組與洛汀新組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  4.腎臟病理變化:HE和Masson染色顯示,SOR組各時(shí)間點(diǎn)腎小球和腎小管形態(tài)正常,未見(jiàn)腎纖維化病理改變;其余各組腎皮質(zhì)逐漸變薄,可見(jiàn)不同程度腎小管管腔萎縮或閉塞、上皮細(xì)胞空泡變性和炎性細(xì)胞浸潤(rùn),間質(zhì)中藍(lán)染膠原纖維逐漸增多,21天達(dá)到高峰;與SOR組相比,其余各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)和膠原染色陽(yáng)性面積均明顯增加(

6、P<0.05),與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新組各時(shí)間點(diǎn)腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)和膠原染色陽(yáng)性面積均明顯降低(P<0.05),腎纖康組與洛汀新組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  5.免疫組織化學(xué)染色檢查
  5.1α-SMA: SOR組中α-SMA僅在腎小球血管平滑肌細(xì)胞上少量表達(dá),各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)無(wú)變化,其余各組大鼠UUO術(shù)后腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞中可見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá),隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增加(P<0.05);與UUO

7、組相比,腎纖康組和洛汀新組各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)明顯減少(P<0.05);腎纖康組和洛汀新組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  5.2β-catenin和Wnt4:β-catenin和Wnt4在SOR組腎小管上皮細(xì)胞基底側(cè)少量表達(dá),隨著時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)均無(wú)明顯變化,其余各組大鼠UUO術(shù)后在腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)逐漸增加(P<0.05);與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新組各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)明顯減少(P<0.05);腎纖康組和洛汀新組比較差異無(wú)統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  5.3相關(guān)性分析:UUO組腎組織β-catenin和Wnt4分別與α-SMA表呈正相關(guān)(r分別為0.982,0.934;P均<0.05)。
  6.Western blot檢測(cè)
  Wnt4、α-SMA、β-catenin蛋白在SOR組大鼠腎臟中表達(dá)較低,而在UUO組中隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增加(P<0.05);與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新組中上述蛋白表達(dá)均明顯下降(P<0.05)

9、,腎纖康組和洛汀新組表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  7.Real time PCR檢測(cè)
  Wnt4、α-SMA、β-catenin mRNA在SOR組有少量表達(dá),UUO術(shù)后表達(dá)逐漸增高,21天達(dá)到最高;與SOR組相比,其余各組均明顯升高(P<0.05),與UUO組相比,腎纖康組和洛汀新組腎組織中Wnt4、α-SMA、β-catenin mRNA量均明顯下降(P<0.05),腎纖康組和洛汀新組表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

10、意義(P>0.05)。
  結(jié)論:
  1.腎纖康顆??梢越档蚒UO大鼠Scr、BUN、腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)及腎間質(zhì)膠原纖維面積,作用效果與苯那普利相當(dāng)。
  2.Wnt/β-catenin信號(hào)通路在UUO大鼠模型中活性增強(qiáng),其關(guān)鍵信號(hào)蛋白β-catenin和Wnt4的表達(dá)與腎纖維化程度呈正相關(guān)。
  3.腎纖康顆??赡芡ㄟ^(guò)抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路而減少α-SMA及膠原纖維的表達(dá),延緩UUO大鼠腎間質(zhì)

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