內(nèi)抑素組織表達(dá)趨勢(shì)與腎間質(zhì)微血管損傷的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討在幼年大鼠腎間質(zhì)微血管損傷過程中內(nèi)抑素（endostatin, ENS）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endotheliAlgrowth factor, VEGF)、CD31組織定位表達(dá)的趨勢(shì)、相關(guān)性及其潛在的病理意義，以及用阿托伐他汀干預(yù)的效應(yīng)。
　　 方法：（1）采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法制備實(shí)驗(yàn)性梗阻性腎小管間質(zhì)損傷模型（UUO模型）；3-4周齡幼年雄性SD大鼠72只，分為正常對(duì)照組（24只）、模型組（24

2、只）、模型干預(yù)組（24只），于實(shí)驗(yàn)第1、3、7、14天每組各取6只大鼠，取病變腎臟石蠟包埋并切片；（2）HE 染色觀察腎小管萎縮擴(kuò)張、間質(zhì)微血管損傷情況；（3）Masson 染色評(píng)價(jià)腎間質(zhì)纖維化程度；（4）免疫組化方法檢測(cè)大鼠腎組織ENS、VEGF及CD31的表達(dá)，并從時(shí)間和組織定位表達(dá)趨勢(shì)上評(píng)價(jià)ENS、VEGF及CD31的相關(guān)性，探討ENS在腎間質(zhì)微血管損傷中的作用；（5）用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果

3、：（1）常規(guī)HE及Masson 染色：正常對(duì)照組腎臟結(jié)構(gòu)無明顯病理改變；模型組術(shù)后術(shù)后3天即可見遠(yuǎn)端腎小管擴(kuò)張，管周毛細(xì)血管減少，腎間質(zhì)輕度水腫，術(shù)后7天近端腎小管擴(kuò)張明顯，間質(zhì)中大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，部分小管上皮細(xì)胞變性壞死；第14天可見彌漫的腎小管基底膜增厚皺縮，膠原增多，纖維化明顯，膠原纖維染色綠染面積增多，且不同時(shí)間點(diǎn)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均<0.01）。模型干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)腎間質(zhì)病變程度較模型組輕，但較對(duì)照組重（P 均<0.01）

4、。（2）免疫組化染色測(cè)定腎間質(zhì)ENS、VEGF及CD31蛋白表達(dá)情況：?對(duì)照組：ENS蛋白弱表達(dá)于腎小球上皮細(xì)胞和腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿，腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)幾乎無表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)差異無顯著性（P 均>0.05）。VEGF蛋白廣泛表達(dá)于腎小球上皮細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞及足突細(xì)胞，呈黃色顆粒狀分布于細(xì)胞胞漿中，各時(shí)間點(diǎn)差異無顯著性（P 均>0.05）；CD31蛋白廣泛表達(dá)于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中，呈黃色顆粒狀分布于細(xì)

5、胞胞漿中，各時(shí)間點(diǎn)差異無顯著性（P 均>0.05）；②模型組：ENS蛋白術(shù)后1天在腎小管上皮細(xì)胞部位的表達(dá)漸增加，陽性信號(hào)強(qiáng)于對(duì)照組，且在間質(zhì)中出現(xiàn)片狀表達(dá)，隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延續(xù)，病變的加重，上述表達(dá)趨勢(shì)明顯加強(qiáng)，7d時(shí)表達(dá)最強(qiáng)，后隨病變的發(fā)展表達(dá)反而較前下降；VEGF 術(shù)后7天，足突細(xì)胞未見陽性表達(dá)，部分腎小管上皮細(xì)胞胞漿中有弱陽性表達(dá)表達(dá)陽性程度弱于正常對(duì)照組；隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重，VEGF表達(dá)的陽性面積均呈顯著遞減，術(shù)后第14

6、天，表達(dá)明顯減弱；CD31術(shù)后第1天在腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和腎小管周毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有表達(dá)，術(shù)后3天，CD31表達(dá)開始減弱隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重，腎小管周圍毛細(xì)血管密度明顯遞減，術(shù)后14天表達(dá)減弱明顯。三種蛋白表達(dá)各時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)比較差異有顯著性（P 均<0.01），各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比差異有顯著性（P 均<0.01）；③模型干預(yù)組：ENS蛋白表達(dá)各時(shí)間點(diǎn)明顯低于模型組，但高于對(duì)照組，差別有均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均<0.01）；CD31蛋白表達(dá)各

7、時(shí)間點(diǎn)明顯高于模型組，但低于對(duì)照組，差別有均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均<0.01）。（3）相關(guān)性分析：模型組ENS與VEGF及CD31之間相關(guān)系數(shù)r值均小于零，呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，VEGF與CD31之間相關(guān)系數(shù)r值大于零，呈正相關(guān)關(guān)系(P 均<0.01)。
　　 結(jié)論：本研究提示UUO 幼鼠腎間質(zhì)纖維化早期腎間質(zhì)內(nèi)ENS表達(dá)上調(diào)，VEGF與CD31表達(dá)下調(diào)，ENS與CD31及VEGF表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，VEGF與CD31表達(dá)呈正相關(guān)。表明在幼年