N-cadherin和mmp-2介導(dǎo)Bex2調(diào)節(jié)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移及侵襲的作用研究.pdf

1、目的：檢測(cè)并研究Bex2對(duì)U251神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移及侵襲的影響并探討其作用機(jī)制，為膠質(zhì)瘤的基因治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1.通過(guò)WB檢測(cè)針對(duì)人Bex2基因特異性的三條siRNA oligo對(duì)Bex2基因的干擾效果；2.通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默及過(guò)表達(dá)Bex224h、48h、72h后U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移的變化；3.通過(guò)Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默及過(guò)表達(dá)Bex224h、

2、48h、72h后U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲能力的變化；4.通過(guò)WB實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默Bex248h后N-cadherin表達(dá)及定位的變化；5.通過(guò)明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在基因沉默Bex248h后細(xì)胞分泌MMP-2的變化。
　　結(jié)果：1.針對(duì)Bex2特異性三條siRNA oligo，干擾效率達(dá)70％-80%；2.劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)染siRNA oligo48小時(shí)、72小時(shí)后細(xì)胞遷移數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P<0.01)

3、，過(guò)表達(dá)Bex248小時(shí)、72小時(shí)后穿過(guò)濾膜的細(xì)胞數(shù)目明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；3.Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)染siRNA oligo48h后細(xì)胞侵襲數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P<0.01)，過(guò)表達(dá)Bex248h后高于對(duì)照組(P<0.01)；4.明膠酶譜實(shí)驗(yàn)顯示：與對(duì)照組相比，siRNA oligo組MMP-2的活性明顯降低(P<0.05)；5.WB檢測(cè)到干擾Bex2基因后48h N-cadherin升高明顯，與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)