NF-κB介導Bex2對腦膠質(zhì)瘤增殖的作用及機制研究.pdf

1、目的：本研究在前期發(fā)現(xiàn)Bex2促進膠質(zhì)瘤細胞增殖的基礎上，重點探討其促進膠質(zhì)瘤細胞增殖的具體機制，為膠質(zhì)瘤的分子靶向治療提供潛在的靶點。
　　方法：1.在體外培養(yǎng)的U251膠質(zhì)瘤細胞中，通過LipofectamineTM-2000分別轉(zhuǎn)染Bex2的過表達質(zhì)?；蛘遱iRNA，運用RT-PCR、Western blot(WB)等方法檢測過表達和干擾效果；CCK-8法檢測細胞增殖情況。2.U251細胞中干擾或者過表達Bex2后，RT-P

2、CR、WB檢測p65/NF-κB的核酸及蛋白水平的變化；WB檢測ERK活性水平(p-ERK)；3.在體外培養(yǎng)的U251膠質(zhì)瘤細胞中，過表達p65或用siRNA下調(diào)p65表達，運用RT-PCR、WB等方法檢測過表達和干擾效果；CCK-8法檢測U251細胞增殖情況；WB檢測p-ERK的變化。4.U251細胞中干擾p65后，RT-PCR、WB檢測Bex2核酸及蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：1.在U251細胞中下調(diào)Bex2后細胞增殖能力明顯

3、下降，過表達Bex2產(chǎn)生相反的結(jié)果。2.過表達Bex2后，p65核酸及蛋白水平均增加，p-ERK水平增高。3.下調(diào)Bex2表達后，p65核酸及蛋白水平降低，活性(p-p65水平)降低，p-ERK水平降低。4.過表達p65后，U251細胞增殖能力明顯升高；p-ERK水平增高。5.下調(diào)p65后細胞增殖能力明顯下降；p-ERK減少。6.下調(diào)p65表達后，Bex2核酸及蛋白水平均沒有變化。
　　結(jié)論：在U251膠質(zhì)瘤細胞中，Bex2促進p