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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文用于防齲DNA疫苗粘膜給藥的陽(yáng)離子脂質(zhì)體載體的研究姓名:奚穎霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生化與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:甘璐20090518II華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractItisakeyfactfsuccessfulgenetherapytodevelopefficientsafegenedeliverycarriersthatcantransferDNAintothenucleiofthetargetce
2、lls.Cationicliposomeisoneofthemostpromisingnonviralsystemsfgenetherapy.CationicliposomeDNAcomplexes,alsoknownaslipoplexes,areselfassemblingnanosystems.TheycantransferDNAintoalargevarietytypesofcells.Inthepresentstudywepr
3、eparedDOTAPDOPEliposomesacterizedtheinteractionsbetweenthesecationicliposomesplasDNAbyphysicochemicalresearchesstudiedtheirtransfectionefficiencyinvitro.Themainresultsareasfollows:(1)DOTAPDOPEcationicliposomeswereprepare
4、dbythemethodoffilmdispersioninadditionofsonication.Weinvestigatedthetimeofhydrationsonicationofthepreparationtechnology.Severaldatawereacterizedsuchasparticlesizezetapotentialdistributionmphologypreliminaryphysicalstabil
5、ity.Itwasfoundthattherepeatabilityofthepreparationtechnologywaswell.Theresultingsuspensionhadparticlesizeof128.64.6nmPDIof0.1680.016zetapotentialof68.73.8mV.afterthestageat4℃37℃fonemonththecolloidwasstabile.(2)Cationicli
6、posomeDNAcomplexeswerepreparedtheirphysicochemicalpropertieswereacterized.ItwasshownthatDNAfmsstablepositivelygedcomplexeswithcationicliposomesatNPratiosabove1.5byagarosegelelectrophesisparticlesizezetapotentialmeasureme
7、nts.NucleasedigestionassayshowedthatthecomplexesprotectedDNAfromenzymaticdigestion.wealsoinvestigatedtheparticlesizezetapotentialofthelipoplexesthatpreparedatphysiologicalionstrength.ThecomplexeswerefoundpositiveatNPrati
8、osabove3aggregatedtofmlargesizeparticles.Inadditionwepreparedlipoplexeswhichrequiredftheinvivoresearchoftheanimalexperiment.(3)MTTassaytransfectionstudiesinCHONIH3T3cellsshowedthatthecytotoxicityofthecomplexeswererelativ
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