PRRSV病毒分離及其ORF5基因序列分析.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syrldrome，PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起豬的一種新型傳染病。該病自1987年首次在美國發(fā)現(xiàn)以來，迅速遍及世界各地，它所引發(fā)的“流產(chǎn)風(fēng)暴”使養(yǎng)豬業(yè)蒙受了災(zāi)難性的經(jīng)濟(jì)損失。 本研究采集PRRS疑似病料142份，在豬肺泡巨嗜細(xì)胞上進(jìn)行病毒分離，成功分離到15株毒株。根據(jù)GeneBank中PRRSV美洲毒株(VR 2332)

2、基因序列設(shè)計(jì)合成了針對(duì)ORF5基因(含部分ORF4和ORF6基因)的引物，利用RT-PCR方法從15株美洲型分離毒株細(xì)胞培養(yǎng)物中擴(kuò)增出大小約760bp片段，克隆入pMD18-T載體后，送往寶生物工程技術(shù)有限公司測序。應(yīng)用DNAStar軟件對(duì)所測基因的序列與國內(nèi)外已發(fā)表毒株的序列進(jìn)行同源性比較，構(gòu)建基因進(jìn)化樹，并對(duì)其推導(dǎo)氨基酸序列及GP5蛋白的一些特性與國內(nèi)外已發(fā)表毒株進(jìn)行比較。分析結(jié)果表明15株分離毒株與PRRS美洲型毒株親緣關(guān)系較近，