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1、目的利用雜交瘤技術(shù)建立分泌抗旋毛蟲肌幼蟲排泄分泌(ES)抗原單克隆抗體(McAb)雜交瘤細胞株,并對其及分泌的McAb進行鑒定.方法用旋毛蟲肌幼蟲ES抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾細胞與小鼠骨髓瘤SP2/0細胞融合,篩選分泌高滴度McAb雜交瘤細胞株,制備腹水進行純化.采用ELISA間接法、夾心法、競爭法分別測定培養(yǎng)細胞上清液及腹水中McAb滴度、相對親和力和相加效應(yīng),瓊脂雙擴散試驗鑒定免疫球蛋白類型,檢測McAb與日本血吸蟲成蟲抗原
2、、蟲卵抗原、弓形蟲RH株速殖子抗原、豬囊蟲囊液抗原、包蟲囊液抗原、旋毛蟲成蟲表皮抗原、成蟲可溶性抗原、成蟲ES抗原、肌幼蟲可溶性抗原、肌幼蟲48hES抗原、肌幼蟲72hES抗原的交叉反應(yīng).電鏡觀察雜交瘤細胞超微結(jié)構(gòu),計數(shù)染色體數(shù)目及觀察雜交瘤細胞分泌McAb的穩(wěn)定性.結(jié)論獲得2株抗旋毛蟲肌幼蟲ES抗原雜交瘤細胞株,均能穩(wěn)定分泌敏感性強、特異性高的IgM類McAb,并可識別不同的抗原決定簇,為進一步建立檢測旋毛蟲循環(huán)抗原(CAg)、早期診
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