單克隆抗體的制備

1、2.2.2單克隆抗體,,1、簡述單克隆抗體制備的過程。2、了解單克隆抗體在醫(yī)學實踐中的應用。,【學習目標】,,什么是抗體？抗體是怎么產生的？ 抗體是機體受抗原刺激后產生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結合的具有免疫功能的球蛋白。,,知識回顧,（一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法（血清抗體）,1、把某種抗原反復注射到動物體內，使動物產生抗體，然后，從動物血清中分離出所需的抗體。,2、血清抗體的缺點： 產量低，純度低，特異性差。,,為了解決血清

2、抗體產量低、純度低，特異性差這一難題，科學家們進行了多年的研究和探索。他們發(fā)現(xiàn)，哺乳動物感染病原體后，體內會形成相應的B淋巴細胞。B淋巴細胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病原體。動物在免疫反應的過程中，體內產生的特異性抗體的種類可多達百萬種以上，但是每一個B細胞只分泌一種特異性抗體。,熟讀精思：,,所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細胞，形成細胞群。,1、B淋巴細胞是一種高度分化的細胞，有沒有可能通過細胞培養(yǎng)進行無限增殖？,

3、不可能,2、我們學過的什么細胞具有這樣的能力？,癌細胞,3、有什么辦法讓B淋巴細胞也具有這樣的能力？,細胞融合,,用單個B淋巴細胞進行（無性繁殖）克隆，得到的基因型相同的細胞群能夠分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體。,單克隆抗體的概念：,（二）單克隆抗體的制備過程,創(chuàng)始人：米爾斯坦,柯勒,1975年設計實驗,1984年獲得諾貝爾生理學和醫(yī)學獎,,,單克隆抗體的制備,,例題1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經培養(yǎng)可

4、產生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（ ） A、經過免疫的B淋巴細胞 B、不經過免疫的T淋巴細胞 C、經過免疫的T淋巴細胞 D、不經過免疫的B淋巴細胞,,2. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（ ） ①淋巴細胞?、谛∈蠊撬枇黾毎、跙淋巴細胞自身融 合細胞　④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞　

5、 ⑤雜交瘤細胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③,,考考你！,1.在制備單克隆抗體的過程中，選用哪兩種細胞進行融合？為什么選擇這兩種細胞？,漿細胞和骨髓瘤細胞漿細胞能產生單一抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖，但不能產生單一抗體。,,2、在這過程中進行了幾次篩選？分別在哪個步驟進行篩選？,兩次篩選。第一次在B細胞和骨髓瘤細胞

6、融合以后篩選出雜交瘤細胞；第二次在雜交瘤細胞中篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。,3、單克隆抗體具有哪些優(yōu)點？,特異性強，靈敏度高，可大量制備,,3、動物細胞融合的目的中最重要的是（ ）A、克服遠緣雜交不親和 B、制備單克隆抗體C、培育新物種 D、生產雜種細胞,,（三）單克隆抗體的應用,1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準確、高效、簡易、快速特點.,,用抗

7、人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度很高。在妊娠第8天就可以做出診斷。比原來的診斷方法提前了10天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對胎兒造成不利影響。該方法檢測的準確率在90%以上。,2、用于治療疾病和運載藥物：主要用于癌癥治療。生物導彈：抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學藥物或細胞毒素。（單克隆抗體：導向。準確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。）,4、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（

8、 ）A．利用單克隆抗體特異性地對抗癌細胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞C．抗癌物質在克隆細胞中大量合成D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結合,,5．只能使動物細胞融合的常用誘導方法（ ?。?A．PEG　 B．滅活的病毒 C．電刺激 D．離心6、“生物導彈”是指 （　 ） A.單克隆抗體 　　B.雜交瘤細胞 C.產生特定抗體的B淋巴細胞　　 D