細(xì)菌蛋白HrpA單克隆抗體的制備.pdf

1、植物病原細(xì)菌中,調(diào)控植物過敏性反應(yīng)和致病性反應(yīng)的基因稱為過敏性反應(yīng)和致病性基因(hypersensitive reaction and pathogenicity,hrp基因).幾乎在所有的動植物革蘭氏陰性病原細(xì)菌都含有此類基因.這些基因多組織成基因簇的形式且相當(dāng)保守.在誘導(dǎo)培養(yǎng)基或植物體內(nèi),基因簇中的一個(gè)結(jié)構(gòu)基因hrpA編碼的蛋白質(zhì)HrpA,是細(xì)菌表面一種絲狀且類似鞭毛的表面附屬物(Hrp菌毛)的主要組分.Hrp菌毛在植物與病菌的相互

2、作用中扮演十分重要的角色.病原細(xì)菌能否使親和性的植物發(fā)病與其Hrp菌毛的有無有直接的和決定性的聯(lián)系.為進(jìn)一步研究Hrp菌毛的功能和利用抗體工程方法控制這類植物病害,我們采用雜交瘤技術(shù),對已經(jīng)轉(zhuǎn)化了丁香假單胞菌番茄變種hrpA基因的大腸桿菌表達(dá)的工程蛋白HrpA(Ps)為抗原,經(jīng)過免疫、融合、篩選、克隆等步驟,獲得了可以產(chǎn)生特異性抗體的2株單克隆雜交瘤細(xì)胞系.ELISA和Western blotting分析表明,用工程菌株誘導(dǎo)表達(dá)的工程蛋