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文檔簡介
1、S-腺苷-L-蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine, SAM)是存在于各種生物體內(nèi)的天然物質(zhì),它作為重要的甲基供體參與諸多生化反應(yīng)。SAM可以用來治療肝臟疾病、抑郁癥、關(guān)節(jié)炎和纖維性肌痛等疾病。本論文的研究目的是提供一種應(yīng)用基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)SAM,并將其從發(fā)酵液中提取出來,制備為SAM穩(wěn)定性鹽產(chǎn)品的方法。全文研究了應(yīng)用基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)S-腺苷-L-蛋氨酸的技術(shù)和工藝流程,探索了S-腺苷-L-蛋氨酸分離純化及其穩(wěn)定性
2、鹽產(chǎn)品的制備條件。論文對SAM的性質(zhì)、藥理作用以及當(dāng)前國際上關(guān)于SAM的研究進展進行了較為詳盡的綜述,并在此基礎(chǔ)上確立了研究內(nèi)容,取得了如下成果: 1)利用本實驗室構(gòu)建的基因工程菌JM71發(fā)酵生產(chǎn)S-腺苷-L-蛋氨酸,在50 L發(fā)酵罐中發(fā)酵6天后,SAM終產(chǎn)量達到6 g/L發(fā)酵液。摸索出發(fā)酵生產(chǎn)SAM的適宜條件為:溫度28~30℃,pH 5.5~6.0,溶氧大于30%。 2)研究出一種收率較高、工藝簡單的分離純化SAM方
3、法。確定了分離純化SAM的最優(yōu)條件是:在pH值5.0時,含SAM濃度為3.0 g/L的上柱液,以6 L/h的流速,過裝填D152樹脂的離子交換柱(φ50 mm×1500 mm)后以去離子水和醋酸洗脫除雜,再用9 L到15 L濃度為50 mmol/L的硫酸以6 L/h的流速洗脫,可以分離得到純度較高的SAM粗品。 3)用脫色樹脂D202對粗品進行脫色,脫色液經(jīng)反滲透濃縮后用4倍體積的無水甲醇沉淀結(jié)晶后離心(3000 r/min),
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