已閱讀1頁，還剩49頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀
版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、本文利用含有質(zhì)粒pKD46的大腸桿菌菌株BW25113。在阿拉伯糖誘導(dǎo)后，表達入噬菌體的3個重組蛋白Gam，Bet和Exo。Gam蛋白抑制了宿主的RecBCD核酸外切酶V活性，而Bet和Exo參與了基因重組過程，因此宿主菌就具有了同源重組的能力。設(shè)計的引物5'端有39 bp的擬敲除基因的同源臂，3'端為擴增引物，以pKD3(或pKD4)為模板，擴增兩側(cè)含F(xiàn)RT位點的氯霉素(或卡那霉素抗性)基因，將此線性片段電轉(zhuǎn)入具重組功能的感受態(tài)細胞，
2、利用氯霉素(或卡那霉素抗性)平板就可以篩選到陽性轉(zhuǎn)化體。再利用表達FlP重組酶的質(zhì)粒pCP20，可將FRT位點之間的氯霉素(或卡那霉素抗性)抗性基因刪除。利用該重組系統(tǒng)，構(gòu)建了乙醇脫氫酶(adhE)、D-乳酸脫氫酶(IdhA)雙缺失的大腸桿菌工程菌株BW25113D，乙酸激酶(ackA)缺失的大腸桿菌工程菌株(BW25113)。并將表達牛鏈球菌L-乳酸脫氫酶基因(IdhL)的pSE380質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到BW25113D菌株中，利用SDS-PA
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大腸桿菌基因工程菌生產(chǎn)番茄紅素研究.pdf
- 產(chǎn)烷烴基因工程菌的構(gòu)建.pdf
- 25223.利用木聚糖產(chǎn)生乙醇的大腸桿菌基因工程菌的構(gòu)建
- 產(chǎn)赤蘚糖醇基因工程菌的構(gòu)建.pdf
- 大腸桿菌基因工程
- 基于代謝工程構(gòu)建大腸桿菌L-賴氨酸高產(chǎn)菌.pdf
- 具有氨氧化功能大腸桿菌工程菌的構(gòu)建.pdf
- 產(chǎn)奎尼酸基因工程菌的構(gòu)建.pdf
- L-苯丙氨酸基因工程菌的構(gòu)建及其發(fā)酵條件研究.pdf
- 大腸桿菌基因工程資料
- 產(chǎn)尿毒素分解酶基因工程菌的構(gòu)建.pdf
- 38292.油菜黑芥子酶基因的大腸桿菌工程菌構(gòu)建和表達研究
- 生物柴油基因工程菌的構(gòu)建.pdf
- 基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)S-腺苷-L-蛋氨酸的研究.pdf
- 乳酸片球菌L-乳酸脫氫酶基因的克隆及在大腸桿菌中的表達.pdf
- 熱休克蛋白對產(chǎn)乙醇的基因工程大腸桿菌抗逆性影響.pdf
- 大腸桿菌基因工程菌轉(zhuǎn)化半纖維素水解液生產(chǎn)木糖醇的研究.pdf
- 產(chǎn)PuFAs土壤真菌篩選及EPA基因工程菌構(gòu)建.pdf
- 8120.l天冬酰胺酶基因工程菌的構(gòu)建
- 雞致病性大腸桿菌基因工程菌株的構(gòu)建及其免疫原性的研究.pdf
評論
0/150
提交評論