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文檔簡介
1、目的:研究CD3+CD56+NKT-like細胞在原發(fā)性干燥綜合征(primary Sjogren's syndrome,pSS)患者外周血、唇腺組織中的分布,探索NKT-like細胞在pSS中可能的作用機制。
方法:CD3+CD56+標(biāo)記NKT-like細胞,采用流式細胞術(shù)檢測pSS患者及健康對照組外周血NKT-like細胞比例、其表面CX3CR1、CXCR5、FasL的表達,用CFSE染色檢測NKT-like細胞的增殖能力
2、,用AnnexinⅤ/7AAD標(biāo)記凋亡狀態(tài),胞內(nèi)細胞因子刺激(ICCS)法觀察NKT-like細胞細胞因子的表達譜。分別用ELISA及CBA法測定血清CXCL13和CX3CL1含量。用體外趨化實驗驗證重組人CX3CL1(rhCX3CL1)和重組人CXCL13(rhCXCL13)對NKT-like細胞的趨化作用。免疫熒光法探測CD3+CD56+NKT-like細胞在唇腺組織中的分布及CX3CR1在唇腺組織中的表達,用免疫組化法探測CX3C
3、L1在唇腺組織的表達。結(jié)合外周血流式染色、血清的結(jié)果以及臨床資料進行相關(guān)性分析。
結(jié)果:與健康對照組(HC)相比,pSS患者CD3+CD56+NKT-1ike細胞在外周血中顯著減少,且增殖能力及凋亡狀態(tài)無顯著差異。但在唇腺組織中表達增多,主要分布在腺泡周圍。pSS患者外周血CX3CL1、CXCR5水平升高,其中CX3CL1的水平與血清IgG水平正相關(guān)。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like細胞表面很少表達CXCR5
4、,多表達CX3CR1,與HC均無顯著性差異。rhCX3CL1對CD3+CD56+NKT-like細胞有顯著的趨化作用,且隨著濃度的增加,趨化作用增強,而rhCXCL13則無顯著的趨化作用。pSS患者唇腺組織中腺泡上皮細胞高表達CX3CL1,而HC幾乎很少表達;同時浸潤唇腺組織的淋巴細胞多表達CX3CR1,包括腺泡周圍淋巴細胞。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like細胞以分泌TNF-α和IFN-γ為主,很少分泌IL-4,幾乎不
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