原發(fā)性干燥綜合征外周血CD4+T細(xì)胞FOXP3基因DNA甲基化異常的研究.pdf

1、目的:DNA甲基化異常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、系統(tǒng)性硬皮病(SSC)等自身免疫性疾病的發(fā)病中起著重要作用。Treg細(xì)胞能介導(dǎo)機(jī)體自身免疫耐受，在自身免疫性疾病的發(fā)生中起保護(hù)作用。轉(zhuǎn)錄因子FOXP3對Treg的增殖分化及正常功能的維持起關(guān)鍵作用。有研究表明FOXP3在自身免疫性疾病中表達(dá)異常且與DNA甲基化異常相關(guān)。本課題主要通過研究原發(fā)性干燥綜合征(primary Sj(o)grensyndrome，pSS)患者外周血CD4+T細(xì)胞

2、中FOXP3基因的表達(dá)水平及其甲基化狀態(tài)，從而探討表觀遺傳學(xué)在pSS發(fā)病中的作用。
　　方法:取pSS患者、正常人外周血，用密度梯度離心法分離得到單個核細(xì)胞，進(jìn)一步用磁珠法分選得到CD4+T細(xì)胞。分別采用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time RT-PCR)和Western blot檢測CD4+T細(xì)胞中FOXP3的mRNA和蛋白表達(dá)水平，亞硫酸氫鈉測序法檢測FOXP3基因啟動子區(qū)域的甲基化狀態(tài)。
　　結(jié)果:與健康對照相比，