B細(xì)胞在原發(fā)性干燥綜合征及其小鼠模型中的作用.pdf

1、目的:原發(fā)性干燥綜合征(primary Sj(o)gren's syndrome，pSS)，是一種自身免疫介導(dǎo)的慢性炎性疾病。B細(xì)胞在該病的發(fā)病過(guò)程可能中起到了重要的作用。但B細(xì)胞在干燥綜合征的發(fā)病過(guò)程的作用機(jī)理還不是很明確。在這項(xiàng)研究里，我們將研究B細(xì)胞在原發(fā)性干燥綜合征及其小鼠模型中的作用。
　　方法:為了在分子水平上研究調(diào)節(jié)IgG重鏈表達(dá)的GTF2I因與原發(fā)性干燥綜合征的關(guān)系，我們通過(guò)PCR擴(kuò)增然后測(cè)序的方法，對(duì)病人和健康人

2、的GTF2Irs117026326位點(diǎn)進(jìn)行基因分型。通過(guò)熒光定量PCR的方法，對(duì)病人白細(xì)胞中GTF2I等基因的表達(dá)情況進(jìn)行定量。為了研究B細(xì)胞在干燥綜合征模型小鼠中的作用，我們利用anti-CD20抗體敲除模型小鼠的體內(nèi)B細(xì)胞，通過(guò)用ELISA檢測(cè)小鼠血清中的自身抗體，用免疫印記檢測(cè)抗體的表位擴(kuò)展情況，在免疫后6周和12周檢測(cè)唾液和淚液的分泌情況，用H&E染色、免疫組化等技術(shù)研究外分泌腺以及肺部組織學(xué)變化情況。
　　結(jié)果:我們的結(jié)

3、果發(fā)現(xiàn)健康人里GTF2Irs117026326的T等位基因的頻率是11.48％，而在病人里GTF2Irs117026326的T等位基因頻率為18.06％。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，得到GTF21rs117026326多態(tài)性位點(diǎn)與pSS有顯著的相關(guān)性(OR=1.70，95％CI=1.01-2.88P=0.048)。進(jìn)一步分析顯示GTF2Irs117026326多態(tài)性與anti-SSA自身抗體陽(yáng)性的pSS顯著相關(guān)(OR=1.87，95％CI=1.08-3

4、.24，P=0.026)，但和Anti-SSA自身抗體陰性的pSS沒(méi)有顯著的相關(guān)性（OR=1.01，95％CI=0.29-3.48，P=0.992）。定量PCR的結(jié)果表明GTF2Irs117026326多態(tài)性并不影響GTF21基因在外周血白細(xì)胞中的表達(dá)。動(dòng)物模型的研究結(jié)果顯示，在免疫Ro60_316-335多肽后，C3H/HeNCrl模型小鼠會(huì)產(chǎn)生針對(duì)Ro60_316-335多肽的抗體并出現(xiàn)多種類(lèi)似pSS的臨床癥狀，包括通過(guò)表位擴(kuò)展產(chǎn)生

5、針對(duì)其它多種自身抗原的抗體、外分泌腺腺體分泌功能受損和肺纖維化。當(dāng)用anti-CD20抗體把體內(nèi)B細(xì)胞敲除后，C3H/HeNCrl小鼠不再產(chǎn)生抗體，表位擴(kuò)展現(xiàn)象消失，同時(shí)小鼠的外分泌腺分泌功能受損情況得到改善。然而，B細(xì)胞敲除后，C3H/HeNCrl小鼠的肺部纖維化病變沒(méi)有變化。
　　結(jié)論:我們的結(jié)果確認(rèn)了GTF2Irs117026326多態(tài)性與pSS的相關(guān)性，并且進(jìn)一步證明這一多態(tài)性位點(diǎn)與anti-SSA自身抗體陽(yáng)性的pSS相關(guān)