Cathepsin S在原發(fā)性干燥綜合征發(fā)病中作用的研究.pdf

1、目的：
　　探討組織蛋白酶(Cathepsin，Cat)S及相關(guān)細(xì)胞亞群在原發(fā)性干燥綜合征(pSS)發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法：
　　1.通過酶聯(lián)免疫吸附方法(ELISA)檢測(cè)pSS患者及健康對(duì)照(HCs)血清總Cat S和pro-Cat S的濃度，并分析其在pSS患者血清中的變化及其與ESSDAI評(píng)分、IgG水平、RF滴度及自身抗體之間的相關(guān)性;
　　2.免疫組化檢測(cè)pSS和單純口干癥患者唇腺組織Cat S的

2、表達(dá)，并分析Cat S表達(dá)水平與灶性指數(shù)(FS)及臨床指標(biāo)之間的相關(guān)性;
　　3.免疫熒光共定位分析pSS組織Cat S與CD68、CD20和CD83共定位情況，并分析CD56+NK細(xì)胞浸潤(rùn)部位;分析pSS患者唇腺各細(xì)胞表達(dá)比例及與FS的關(guān)系;
　　4.采用受試者工作曲線(ROC)確定診斷最佳閾值，t檢驗(yàn)、Mann-Whitney檢驗(yàn)進(jìn)行獨(dú)立樣本兩組之間比較，Spearman相關(guān)性分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：

3、>　　1.pSS組血清總Cat S，pro-Cat S和active-Cat S表達(dá)水平顯著高于HCs(p＜0.05);但其表達(dá)水平與SS患者血清IgG水平、RF滴度、自身抗體是否陽(yáng)性及ESSDAI評(píng)分之間無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異及相關(guān)性(p＞0.05)。
　　2.ROC分析發(fā)現(xiàn)，血清總Cat S，pro-Cat S和active-Cat S水平曲線下面積分別為0.811(p＜0.01)、0.655(p＜0.05)和0.701(p＜0.0

4、1);最佳閾值分別為15.77ng/ml、12.62ng/ml、4.062ng/ml;敏感性和特異性分別為0.919和0.697、0.676和0.667、0.622和0.758。
　　3.pSS患者唇腺組織表達(dá)Cat S升高，而單純口干癥對(duì)照未見明顯表達(dá)。
　　4.免疫熒光共定位分析發(fā)現(xiàn)Cat S主要表達(dá)在浸潤(rùn)的專職抗原提呈細(xì)胞(APC，包括B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞）中，同時(shí)在腺泡細(xì)胞及導(dǎo)管上皮細(xì)胞中也有表達(dá)。
　

5、　5.唇腺組織總Cat S表達(dá)水平及分部位(淋巴細(xì)胞，腺泡細(xì)胞及導(dǎo)管上皮細(xì)胞區(qū))CatS表達(dá)水平與FS均呈正相關(guān)(p＜0.05)。
　　6.pSS患者唇腺組織浸潤(rùn)有核細(xì)胞分析得出，主要浸潤(rùn)的細(xì)胞為T細(xì)胞和B細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞占較小的比例，而NK細(xì)胞數(shù)最少。且隨著FS的變化，上述各細(xì)胞浸潤(rùn)比例也隨之發(fā)生變化。
　　7.NK細(xì)胞在pSS唇腺組織的定位有一定的特點(diǎn)，在FS低的患者，主要定位于淋巴細(xì)胞灶內(nèi)，而在FS高的患者中

6、，主要位于淋巴細(xì)胞灶的周邊區(qū)域。
　　結(jié)論：
　　1.Cat S作為抗原提呈途徑的關(guān)鍵酶，在pSS患者外周血清及唇腺組織表達(dá)Cat S均升高，且與專職APC(B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)和非專職APC(腺泡細(xì)胞、導(dǎo)管上皮細(xì)胞)存在共定位現(xiàn)象;此外，唇腺組織表達(dá)Cat S與灶性指數(shù)(FS)呈正相關(guān)，提示Cat S在pSS發(fā)病中促進(jìn)了自身抗原提呈過程，參與了pSS疾病的發(fā)生發(fā)展。因此Cat S可成為pSS患者新的血清學(xué)標(biāo)記物及