齊墩果酸“引經(jīng)”作用增強(qiáng)大黃素肝靶向性的研究.pdf

1、癌癥已經(jīng)成為威脅人類健康的最常見疾病，肝癌已成為三大癌癥致死因素之一，且死亡人數(shù)不斷上升。經(jīng)過幾代醫(yī)藥學(xué)工作者的不懈努力，化療技術(shù)用于控制癌癥已經(jīng)取得了一定的治療效果，但是化療藥的副作用限制其應(yīng)用。因此，發(fā)現(xiàn)和發(fā)展對(duì)殺死腫瘤細(xì)胞有優(yōu)先選擇性而對(duì)正常細(xì)胞副作用小的傳統(tǒng)中藥是治療癌癥的重要趨勢(shì)。許多研究表明，多數(shù)中藥單獨(dú)或結(jié)合應(yīng)用可防止癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移，甚至治療癌癥。但是傳統(tǒng)中藥往往成分復(fù)雜，作用范圍廣，對(duì)特定腫瘤選擇性不強(qiáng)。大黃素來源廣泛

2、，存在于大黃屬、蓼屬、鼠李屬和番瀉葉中，具有抗菌抗炎、抗腫瘤、保護(hù)肝腎等廣泛的藥理作用。齊墩果酸為五環(huán)三萜類天然化合物，對(duì)肝癌細(xì)胞具有明顯的抑制作用。本課題結(jié)合現(xiàn)代藥劑學(xué)新技術(shù)和傳統(tǒng)引經(jīng)理論運(yùn)用于靶向給藥系統(tǒng)的思想，把齊墩果酸作為大黃素脂質(zhì)體表面修飾的材料，提高脂質(zhì)體特異性，選擇性，進(jìn)而提高療效，為基于中藥引經(jīng)理論的靶向給藥研究提供參考。
　　第一部分：
　　目的：建立測(cè)定齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體包封率及藥物含量的高效液相色譜

3、法。方法：色譜柱為Agilent Zorbax C18柱，流動(dòng)相為0.1％磷酸溶液:甲醇=20:80（V/V），紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。結(jié)果：大黃素在2.50～160.00μg/mL濃度范圍內(nèi)，有良好線性關(guān)系，r為0.9996。平均回收率為94.34%～96.60%，RSD≤4.87%。齊墩果酸在2.50～160.00μg/mL濃度范圍內(nèi)，有良好線性關(guān)系， r為0.9995。平均回收率為91.23%～95.15%，RSD≤4.31%

4、。結(jié)論：所建立的高效液相色譜法簡(jiǎn)單、快速、專屬性好，適合用于測(cè)定齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體包封率及藥物含量。
　　第二部分：
　　目的：制備齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體。方法：采取薄膜分散法制備脂質(zhì)體，低溫超速離心法分離脂質(zhì)體及游離藥物。星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化處方，以齊墩果酸和大黃素包封率為指標(biāo)，歸一化處理，篩選最佳處方工藝。結(jié)果：最佳處方為磷脂和兩種藥物(OA和 EM的重量百分比為50%)的重量比26.32，磷脂和膽固醇的重量比16

5、.68，水化介質(zhì)的pH值6.37。OA和EM的包封率實(shí)測(cè)值分別為89.13%，86.16%。結(jié)論：通過星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化，制備的齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體有較好包封率。
　　第三部分：
　　目的：建立高效液相色譜法測(cè)定小鼠尾靜脈給藥后血漿、組織（心、肝、脾、肺、腎）中大黃素的含量。根據(jù)傳統(tǒng)引經(jīng)理論結(jié)合現(xiàn)代藥劑學(xué)新技術(shù)，研究齊墩果酸增強(qiáng)大黃素肝靶向作用，評(píng)價(jià)靶向性指標(biāo)。方法：色譜柱為Thermo Syncronis C18柱，

6、流動(dòng)相為0.1%磷酸溶液:甲醇=15:85（V/V），紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，流速1.0 mL/min。按大黃素劑量5 mg/kg，小鼠尾靜脈注射脂質(zhì)體。檢測(cè)血漿、組織（心、肝、脾、肺、腎）中大黃素濃度，計(jì)算體內(nèi)藥代動(dòng)學(xué)參數(shù)。運(yùn)用靶向性指標(biāo) te、re、TEc評(píng)價(jià)兩種脂質(zhì)體（大黃素脂質(zhì)體和齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體）靶向性。結(jié)果：各生物樣品中大黃素與雜質(zhì)分離良好。大黃素在血漿中0.02～8.00 ug/mL濃度范圍內(nèi)，r為0.9988；

7、心中0.05～1.60μg/mL濃度范圍內(nèi)，r為0.9990；肝中0.05～12.80μg/mL濃度范圍內(nèi)， r為0.9999；脾中0.05～3.20μg/mL濃度范圍內(nèi)，r為0.9991；肺中0.05～6.40μg/mL濃度范圍內(nèi)，r為0.9998；腎中0.05～6.40μg/mL濃度范圍內(nèi)， r為0.9996；有良好線性關(guān)系。各生物樣品大黃素日內(nèi)精密度RSD≤9.87%，日間精密度RSD≤9.95%，穩(wěn)定性RSD≤9.76%，平均提

8、取回收率為70.02%～76.95%, RSD≤7.69%。小鼠尾靜脈注射大黃素脂質(zhì)體組EM半衰期為8.96 h，清除率為974.8 mL/h?kg。小鼠尾靜脈注射齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體組 EM半衰期為9.37 h，清除率為854.14 mL/h?kg。小鼠尾靜脈注射齊墩果酸-大黃素脂質(zhì)體組肝的靶向性指標(biāo)teOA-EM和 TEcOA-EM都大于小鼠尾靜脈注射大黃素脂質(zhì)體組，且肝組織re＞1，。結(jié)論：所建立的高效液相色譜法方法簡(jiǎn)便，專屬性