不同人群腸道肺炎克雷伯菌毒力及耐藥情況研究.pdf

1、目的:研究住院患者、腸道門診腹瀉患者、健康體檢者三個不同人群腸道中肺炎克雷伯菌的攜帶狀況、毒力基因、耐藥性及其分子流行病學(xué)特點(diǎn)。
　　方法:采集三個目標(biāo)人群新鮮糞便標(biāo)本接種于培養(yǎng)基上，應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜（Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flightMass Spectrometr，MALDI-TOF MS）Vitek MS質(zhì)譜儀鑒定篩選出肺炎

2、克雷伯菌，拉絲試驗(yàn)檢測高粘液表型，K-B紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn);合成特異性引物對肺炎克雷伯菌株進(jìn)行莢膜血清型（K1，K2，K5，K20，K54，K57）和相關(guān)毒力基因（wcaG，rmpA，magA和菌素）檢測;PCR擴(kuò)增廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因、超廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因、質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶基因和碳青霉烯類耐藥基因;擴(kuò)增7對管家基因（rpoB，gapA，infB，gpi，PhoE，rpoB，tonB）對菌株進(jìn)行多位點(diǎn)序列分型。
　

3、　結(jié)果:141株肺炎克雷伯菌分離自住院患者（54/125，攜帶率43.2％）、腹瀉的門診患者（44/257，攜帶率17.1％）和健康體檢者（43/141，攜帶率30.5％）。共檢測到49株產(chǎn)毒株，其中35株為高粘液表型菌株。K1型菌株檢出14株(14/141，9.9％)，K2型菌株檢出15株(15/141，10.6％)，K20和K57較少檢出，而K54型菌株未檢出;菌素基因檢出率最高(30.5％)，rmpA次之(19.9％)，wcaG和

4、magA檢出率相對較低（分別為12.1％和9.9％）。健康體檢者攜帶的肺炎克雷伯菌毒力檢出率最高，其中K1/K2莢膜血清型、wcaG、rmpA、magA和菌素檢出率顯著高于住院患者來源的菌株，而對抗生素較敏感。住院患者攜帶的菌株抗生素耐藥率最高，頭孢菌素類抗生素耐藥率大于30％，碳青霉烯類抗生素耐藥率22.2％。肺炎克雷伯菌非產(chǎn)毒株抗生素耐藥率顯著高于產(chǎn)毒株，此外還檢測到3株同時攜帶毒力基因和耐藥基因的菌株（magA+K1+blaSHV

5、-2，菌素+blaTEM-1+blaKPC-2，菌素+wcaG+blaCTX-M-14+ blaSHV-1）。產(chǎn)毒株和非產(chǎn)毒株的序列基因型(ST)分布呈現(xiàn)不同的特點(diǎn)，非產(chǎn)毒株較為分散，而產(chǎn)毒株相對較為集中，ST23、ST86為其主要的ST型。ST23菌株均為K1莢膜血清型，ST65和ST86菌株均為K2型。
　　結(jié)論:肺炎克雷伯菌在住院患者中攜帶率最高，毒力較低而抗生素耐藥率最高;而健康人群攜帶較高比例的產(chǎn)毒株;產(chǎn)毒株比非產(chǎn)毒株對