高毒力肺炎克雷伯菌的微生物學(xué)及臨床特征研究.pdf

1、目的：肺炎克雷伯菌是引起臨床感染的重要病原菌之一，常引起肺炎、尿路感染、血流感染等。1986年，臺(tái)灣首次報(bào)道了一種由肺炎克雷伯菌導(dǎo)致的患者多部位膿腫，并將其定義為高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)。此后，由hvKP導(dǎo)致的獲得性侵襲性感染，特別是化膿性肝膿腫(PLA)，使患者的健康遭到嚴(yán)重的威脅，特別是在亞裔人群中具有較高的感染率，須引起足夠重視。與經(jīng)典的肺炎克雷伯菌(cKP)相比，hvKP具有高黏液型菌落、獨(dú)特的莢膜血清型、攜帶毒力相關(guān)基因

2、等特征。因此，本研究對(duì)本院hvKP的血清型分布及流行趨勢(shì)進(jìn)行相關(guān)的調(diào)查研究，有利于分析其耐藥性、毒力相關(guān)基因及其分子流行病學(xué)特點(diǎn)。
　　方法：收集分離于溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院各種侵襲性感染患者的肺炎克雷伯菌臨床分離株共369株。應(yīng)用VITEK全自動(dòng)微生物分析儀對(duì)所有分離的肺炎克雷伯菌進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。收集感染患者的臨床病例資料。采用拉絲試驗(yàn)檢測(cè)菌株高黏液表型。采用PCR法檢測(cè)肺炎克雷伯菌的莢膜血清型（K1、K2、K5、K20、

3、K54和K57）和17種毒力相關(guān)基因（ybtA、ureA、uge、wabG、ycfM、entB、iutA、vatD、magA、fimH、mrkD、aerobactin、iroN、kfuB、rmpA、wcaG和alls）；應(yīng)用多位點(diǎn)基因序列分型(MLST)技術(shù)對(duì)肺炎克雷伯菌進(jìn)行序列分型；應(yīng)用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)對(duì)其進(jìn)行同源性分析。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：369株肺炎克雷伯菌中，84株為拉絲試驗(yàn)陽(yáng)性

4、，判斷為 hvKP，檢出率為22.8％，其中45.2％與PLA相關(guān)。多變量回歸分析顯示，41-50歲的男性患者、PLA、糖尿病和高血壓是hvKP感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。其中K2型菌株檢出36株（42.9％，36/84），是最常見的莢膜血清型；其次是K1型菌株（23.8％，20/84）。75.0％的K1型菌株與PLA相關(guān)，而K2型菌株與多種類型的侵襲性感染相關(guān)。在hvKP菌株中iutA、mrkD、aerobactin、iroN和rmpA的陽(yáng)性

5、率顯著高于經(jīng)典肺炎克雷伯菌（P＜0.05）。magA、ybtA、alls和wcaG與K1型菌株有顯著相關(guān)性；而mrkD與K2型菌株顯著相關(guān)。mrkD僅在hvKP菌株（32.1％，27/84）和K2型菌株（65.9％，27/41）中檢測(cè)到。所有K1/K2型菌株和cKP菌株均為rmpA陽(yáng)性。95.0％的K1型菌株和97.5％K2型菌株中檢測(cè)到氣桿菌素(aerobactin)。在69株K1、K2、K5、K20和K57型菌株中共檢測(cè)到21種ST

6、型，其中ST23是最常見的類型（27.5％，19/69），并且均為K1莢膜血清型。其次是ST65（26.1％，18/69），均為K2型。ST23-K1型菌株（84.2％，16/19）與PLA密切相關(guān)，而ST65-K2型菌株與多種類型的感染相關(guān)。PFGE結(jié)果顯示84株hvKP菌株的同源性分析是多樣化的。只有5個(gè)克隆群具有超過(guò)70%的相似性，且含有3株以上菌。這5個(gè)克隆群一共只含有35株菌（41.7％，35/84）。
　　結(jié)論：發(fā)現(xiàn)高