耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌的耐藥性及同源性研究.pdf

1、研究背景：
　　肺炎克雷伯菌是革蘭陰性兼性厭氧桿菌，是臨床細菌分離培養(yǎng)最為常見的條件致病菌之一。但是由于廣譜青霉素類、第三代頭孢菌素、單環(huán)類、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合制劑及喹諾酮類等廣譜抗生素在臨床治療肺炎克雷伯菌感染患者中的大量使用，肺炎克雷伯菌能夠產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(ESBLs)和頭孢菌素酶(AmpC酶)等從而對廣譜類抗生素表現(xiàn)出多重耐藥性。碳青霉烯類是β-內(nèi)酰胺類，是臨床治療ESBLs及AmpC酶等腸桿菌科細菌感染患者的一類

2、廣譜抗生素。然而，伴隨著碳青霉烯類抗生素在臨床大量的使用，對碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科以及不動桿菌屬也在逐漸上升，給臨床治療帶來了嚴峻挑戰(zhàn)。其中，耐碳青霉烯類抗生素的主要機制就是細菌產(chǎn)生碳青霉烯酶。碳青霉烯酶是指能夠水解青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類以及β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、氨基糖苷類、喹諾酮類等多種抗菌藥物的一大類β-內(nèi)酰胺酶，能大大降低藥物的作用效果甚至消失。碳青霉烯酶大都由質(zhì)粒介導(dǎo)，具有廣泛的傳播性。
　　本研究對廣州軍

3、區(qū)廣州總醫(yī)院收集的53株耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（CRKP）進行了菌種鑒定以及藥敏試驗，并對其耐藥譜以及耐藥表型進行了研究，檢測碳青霉烯酶基因以及進行了脈沖場凝膠電泳(PFGE)和多位點序列分型(MLST)，并且制定了調(diào)查表進行臨床病例資料收集以及整理。為我院臨床抗生素的合理使用及采取防治措施提供信息參考。
　　研究方法：
　　收集2015年7月到2016年7月自51名患者分離出53株CRKP; VITEK-2全自動微生物儀

4、器以及MALDI-TOF MS對CRKP進行鑒定及藥敏試驗，并同時使用K-B法以及E-test法進行確認;采用改良Hodge試驗(MHT)和EDTA試驗進行碳青霉烯酶表型實驗;PCR檢測常見碳青霉烯酶基因KPC、VIM、IMP、NDM-1、OXA-48基因，并進行測序以及亞型的確定;PFGE和PLST兩種技術(shù)進行同源性研究。
　　研究結(jié)果：
　　53株菌株均為碳青霉烯類耐藥;MHT52株陽性，EDTA均為陰性;52株CRKP

5、攜帶KPC-2，僅有1株細菌攜帶IMP-4，未發(fā)現(xiàn)VIM、NDM-1、OXA-48基因;經(jīng)PFGE分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型4種不同類型;PFGE的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌株屬于ST11;16號為Ⅳ型屬于ST16;本次研究VITEK MS鑒定出來的CRKP包括粘液型在內(nèi)菌株鑒定分值Vitek≥90％，結(jié)果高度可信且與MLST分型的結(jié)果高度相符。
　　結(jié)論：
　　本次研究，53株耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌主要耐藥